大鼠超氧化物歧化酶(SOD)酶聯免疫分析
試劑盒使用說明書
本試劑僅供研究使用 目的:本試劑盒用于測定大鼠血清,血漿及相關液體樣本中超氧化物歧化酶(SOD)的含量。
實驗原理:
本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中大鼠超氧化物歧化酶(SOD)水平。用純化的大鼠超氧化物歧化酶(SOD)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入超氧化物歧化酶(SOD),再與HRP標記的超氧化物歧化酶(SOD)抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的超氧化物歧化酶(SOD)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中大鼠超氧化物歧化酶(SOD)濃度。
試劑盒組成:
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| (20ml×20倍)×1瓶 | | |
樣本處理及要求:
1. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如出現沉淀,應再次離心。
2. 血漿:應根據標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應該再次離心。
3. 尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。
4. 細胞培養上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
5. 組織標本:切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
6. 標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融.
7. 不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
操作步驟:
1. 標準品的稀釋與加樣:在酶標包被板上設標準品孔10孔,在第一、第二孔中分別加標準品100μl,然后在第一、第二孔中加標準品稀釋液50μl,混勻;然后從第一孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為150U/L,100U/L ,50U/L,25U/L, 12.5U/L)。
2. 加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4. 配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。
7. 溫育:操作同3。
8. 洗滌:操作同5。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
11. 測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行。
注意事項:
1. 試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。
2. 濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。
3. 各步加樣均應使用加樣器,并經常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間最好控制在5分鐘內,如標本數量多,推薦使用排槍加樣。
4. 請每次測定的同時做標準曲線,最好做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本OD值大于標準品孔第一孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(n倍)后再測定,計算時請最后乘以總稀釋倍數(×n×5)。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6. 底物請避光保存。
7. 嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.
8. 所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
9. 本試劑不同批號組分不得混用。
10. 如與英文說明書有異,以英文說明書為準。
計算:
以標準物的濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,
在坐標紙上繪出標準曲線,根據樣品的OD
值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋
倍數;或用標準物的濃度與OD值計算出標
準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值
代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋
倍數,即為樣品的實際濃度。
(此圖僅供參考)
試劑盒性能:
1.樣品線性回歸與預期濃度相關系數R值為0.95以上。
2.批內與批見應分別小于9%和11%
檢測范圍:
10U/L -200U/L
保存條件及有效期:
1.試劑盒保存:;2-8℃。
2.有效期:6個月
簡介:
產品規格:48T/96T
產地:國產/進口
適用范圍:僅供科研使用
保存條件:2-8℃
保質期:6個月
產品品牌:酶遠生物
檢測波長:450nm
所需樣本體積:50-100ul
產品用途:用于測定血清、血漿及相關液體樣本
樣本類型:適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞上清、組織勻漿等樣本
酶遠生物供應的其他種屬有:人、大鼠、小鼠、豚鼠、倉鼠、兔子、豬、犬、牛、樣、雞、鴨、植物、貓、馬、魚、猴、農殘elisa試劑盒等
操作步驟:
1. 使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產生加樣上的誤差。
2. 根據待測樣品數量加上標準品的數量決定所需的板條數。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據自己的數量來定,能使用復孔的盡量做復孔。標本用標本稀釋液1:1稀釋后加入50ul于反應孔內。
3. 加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時。
4. 甩去孔內液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數增加一次。
5. 每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。
6. 甩去孔內液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數增加一次。
7. 每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。
8. 取出酶標板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應立即測定結果。
9. 在450nm波長處測定各孔的OD值。
上海酶遠生物科技有限公司專業提供ELISA試劑盒,種屬齊全,指標成千上萬種,質量好發貨及時,穩定的重復性和可靠高,特異性強,優秀的技術團隊竭誠為您服務。
昆蟲卵黃原蛋白受體(VgR)酶聯免疫分析試劑盒說明書
操作注意事項:
1. 試劑盒保存在2-8℃,使用前室溫平衡20分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會有結晶,這屬于正常現象,水浴加熱使結晶完全溶解后再使用。
2. 實驗中不用的板條應立即放回自封袋中,密封(低溫干燥)保存。
3. 預處理后的樣本無需稀釋,直接取50μL加樣即可。
4. 嚴格按照說明書中標明的時間、加液量及順序進行溫育操作。
5. 所有液體組分使用前充分搖勻。
試劑的準備:
20×洗滌緩沖液的稀釋:蒸餾水按1:20稀釋,即1份的20×洗滌緩沖液加19份的蒸餾水。
洗板方法:
1. 手工洗板:甩盡孔內液體,每孔加滿洗滌液,靜置1min后甩盡孔內液體,在吸水紙上拍干,如此洗板5次。
2. 自動洗板機:每孔注入洗液350μL,浸泡1min,洗板5次。
技術原理及自備設備:
ELISA技術原理是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。結合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學活性,酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學活性,又保留酶的活性。在測定時,受檢標本與固相載體表面的抗原或抗體起反應。
自備設備有,蒸餾水,加樣器,振蕩器及磁力攪拌器,酶標儀,量筒,燒杯,吸水紙,坐標紙,溫育箱,洗瓶,一次性試劑管,微移液及其吸嘴等。
用3個質控血清測定值即可進行質控,當這組數據擴大到20次有效值時就可以計算RCV的X。質量控制在整個過程中有著舉足輕重的關系,0.1%的不慎也會引起100%的失敗。該試劑盒敏感度極佳,其預包被微孔板的批內和批間變異系數均小于10%。每一個產品都經過嚴格交叉反應和干擾測試及穩定性試驗,均可滿足廣泛的檢測需求。我們嚴格按照標準生產方案組裝生產,配置完善的售后服務和免費的技術支持,可讓您無后顧之憂。
試劑的準備:
20×洗滌緩沖液的稀釋:蒸餾水按1:20稀釋,即1份的20×洗滌緩沖液加19份的蒸餾水。
洗板方法:
1. 手工洗板:甩盡孔內液體,每孔加滿洗滌液,靜置1min后甩盡孔內液體,在吸水紙上拍干,如此洗板5次。
2. 自動洗板機:每孔注入洗液350μL,浸泡1min,洗板5次。
上海酶遠生物酶標試劑盒操作中出現的問題:現象、可能原因和解決辦法:
1、 不同廠家生產的試劑盒因生產工藝和操作方法略有不同,務必按照所用試劑盒嚴格操作,否則容易產生檢測結果的不確定性.
2、 若不同批號試劑的不同組分(A液或酶工作液),或不同試劑的不同組分進行交叉使用,有可能出現顯色淺或本底高,花板等情形。
3、 加樣時樣品量誤差,對于陰或很陽的標本影響不大,但對閾值附近的標本影響極大,建議校對加樣器。
4、 反應時間的誤差,做大量標本時,第一孔和最后一孔以及一些特殊標本可能影響較大。
5、 由于滴瓶的精密性肯定不如加樣器,不排除不同滴頭滴量的誤差。另外滴加過程中是否產生氣泡、速度是否均勻,是否顫動等影響液量的因素均可導致以上情況。高標準要求時應使用加樣器。
6、 閾值附近實際上是個灰區(gray scale),不能截然分為陰性、陽性,國外廠家均要求對這部分可疑標本進行奇數次復檢,以次數多者為準,如一次陽兩次陰最后判為陰,但實際上是否為陰不好說,只有判為可疑,臨床上可以讓患者過一段時間后再測。
7、 肉眼觀察稍顯色,酶標儀打印為陰性的標本在實際工作中是難以避免的,肉眼目測結果不可靠,應以酶標儀判讀為準。
8、 由陰性變為強陽性原因多為操作過程中漏加試劑等有關。
高手們是這樣挑選“ELISA試劑盒”的:
1. 現在國內大部分市場在供應著進口的試劑盒,在選擇公司這一方面就需要謹慎了,要選品質、評價等方面較好的公司(如上海酶遠生物、上海酶遠生物等),可看它的產品目錄冊,一般提供的產品種類很有限,都是些常用指標,種類少說明是真貨,且外包裝較精美并提供公司的名稱、電話、地址,所有的試劑也都經得起檢驗。
2. 還有一個好的策略就是對照常規品種的指標,因為需要量較大,所以國內公司會用心做研發,一般做的不錯,可以用國產的;對于不常用的指標,因為用量少,國內公司一般不做研發(研發成本較高,需求量少),所以要用國外的品牌,如R&D、TSZ都是不錯的。國產和進口盒子一起用,節省經費而且高性價比。
本司相關優質產品:三聚氰胺(Melamine)ELISA檢測試劑盒 慶大霉素(Gentamicin)ELISA檢測試劑盒 新霉素(Neomycin)ELISA檢測試劑盒 泰樂菌素(Tylosin)ELISA檢測試劑盒 隱性孔雀石綠(Malachitegreen)ELISA檢測試劑盒 呋喃西林(Furacilin(SEM))ELISA檢測試劑盒 呋喃妥因(Nitrofurantoin(AHD))ELISA檢測試劑盒 呋喃它酮(Furaltadone(AMOZ))ELISA檢測試劑盒 呋喃唑酮(Furazolidone(AOZ))ELISA檢測試劑盒 喹諾酮類(Chinolone)ELISA檢測試劑盒 鏈霉素(Streptomycin)ELISA檢測試劑盒 磺胺二甲嘧啶(Sulphamethazine)ELISA檢測試劑盒 磺胺嘧啶(Sulphadiazine)ELISA檢測試劑盒 磺胺類(Sulphonamides)ELISA檢測試劑盒 四環素(Tetracycline)ELISA檢測試劑盒 三聚氰胺(Melamine)ELISA檢測試劑盒 慶大霉素(Gentamicin)ELISA檢測試劑盒 新霉素(Neomycin)ELISA檢測試劑盒 泰樂菌素(Tylosin)ELISA檢測試劑盒 隱性孔雀石綠(Malachitegreen)ELISA檢測試劑盒 呋喃西林(Furacilin(SEM))ELISA檢測試劑盒 呋喃妥因(Nitrofurantoin(AHD))ELISA檢測試劑盒 呋喃它酮(Furaltadone(AMOZ))ELISA檢測試劑盒 呋喃唑酮(Furazolidone(AOZ))ELISA檢測試劑盒 喹諾酮類(Chinolone)ELISA檢測試劑盒 鏈霉素(Streptomycin)ELISA檢測試劑盒 磺胺二甲嘧啶(Sulphamethazine)ELISA檢測試劑盒 磺胺嘧啶(Sulphadiazine)ELISA檢測試劑盒 磺胺類(Sulphonamides)ELISA檢測試劑盒 四環素(Tetracycline)ELISA檢測試劑盒 牛巴貝斯抗體(Babesia)ELISA檢測試劑盒 牛泰勒蟲抗體(Theileria)ELISA檢測試劑盒
哈希、羅威邦COD分析試劑,LOVIBOND試劑管, COD分析試劑管 適用型號:LOVIBOND儀表測量范圍:0 to 150 mg/l COD類型:水劑標識:COD包裝:25次
★COD專用試劑可搭配原廠或自行選購它廠牌試劑★
型 號 LOVIBOND | 測定范圍 | 包裝 | 對照廠牌型號 | ||
Hach | Lamotte | CHEMetries | |||
ET99955/ LR | 0 - 150 ppm | 25支/盒 | 2125825 | 0075-SC | K-7350 |
ET99974/ MR | 0 - 1500 ppm | 25支/盒 | 2125925 | 0076-SC | K-7360 |
ET99106/ HR | 0 - 15000 ppm | 25支/盒 | 2415925 | 0077-SC | K-7370 |
人5-HIAA ELISA檢測分析試劑盒優質現貨 人VD2 ELISA檢測分析試劑盒目前生產廠家哪里有?
人ELISA試劑盒參數規格:
規格:96T/48T
保存條件:2-8℃(頻繁使用時);-20℃(較長時間不用時)
特點:靈敏性高、特異性強、重復性好
種屬:人、大鼠、小鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、羊、雞、鴨、魚等。
運輸:快遞運輸,可根據客戶要求,選擇具體的運輸方式
人ELISA試劑盒產品優勢:
一、高效、靈敏、特異的抗體;
二、穩定的重復性和可靠性;
三、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相載體;
四、適用血清、血漿、組織勻漿液、細胞培養上清液、尿液等等多種標本類型;
五、可檢測指標齊全:細胞因子檢測、心肌梗塞檢測、內分泌檢測、肝纖維化檢測、自身免疫檢測、腫瘤標志物檢測、傳染病檢測、特種蛋白檢測、優生優育檢測等等;
六、價格優惠,質量保證,最大限度的節省實驗經費。
人ELISA試劑盒說明:
1.試劑盒保存:-20℃(較長時間不用時);2-8℃(頻繁使用時)。
2.濃洗滌液低溫保存會有鹽析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶。
3.中、英文說明書可能會有不一致之處,請以英文說明書為準。
4.剛開啟的酶聯板孔中可能會含有少許水樣物質,此為正常現象,不會對實驗結果造成任何影響。
需要而未提供的試劑和器材:
1.標準規格酶標儀
2.高速離心機
3.電熱恒溫培養箱
4.干凈的試管和Eppendof管
5.系列可調節移液器及吸頭,一次檢測樣品較多時,最好用多通道移液器
6.蒸餾水,容量瓶等
人ELISA試劑盒操作步驟:
1,試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。
2,實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。
3,不用的其它試劑應包裝好或蓋好。
4,使用一次性的吸頭以免交叉污染,避免使用帶金屬部分的加樣器。
5,使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
6,洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
7,避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。
8,嚴格按照說明書的操作方法進行操作。說明書以英文說明書為主。
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Human platelet activating factor,PAF ELISA Kit人血小板活化因子(PAF)ELISA KitELISA. 96T/48THuman Tissue-type Plasiminogen Actilyse,t-PA ELISA Kit人組織型纖溶酶原激活劑(t-PA)ELISA KitELISA. 96T/48THuman Tissue factor,IF ELISA Kit人組織因子(TF)ELISA KitELISA. 96T/48THuman β-Thromboglobulin,β-TG ELISA Kit人β血小板球蛋白/β血栓環蛋白(β-TG)ELISA KitELISA. 96T/48THuman Platelet Factor 4,PF-4 ELISA Kit人血小板因子4(PF-4/CXCL4)ELISA KitELISA. 96T/48THuman lymphocyte function associated antigen 2,LFA-2 ELISA Kit人淋巴細胞功能相關抗原2(LFA-2/CD2)ELISA KitELISA. 96T/48THuman leukotriene E4,LT-E4 ELISA Kit 人白三烯E4(LTE4)ELISA Kit ELISA. 96T/48THuman D-Dimer,D2D ELISA Kit人D二聚體(D2D)ELISA KitELISA. 96T/48Thuman Immunoglobulin E,IgE ELISA Kit 人免疫球蛋白E(IgE)ELISA KitELISA. 96T/48THuman Triggering Receptor Expresses on Myeloid Cells-1,TREM-1 ELISA Kit人髓系細胞觸發受體-1(TREM-1)ELISA KitELISA. 96T/48THuman leukoregulin,LR ELISA Kit 人白細胞調節素(LR)ELISA KitELISA. 96T/48THuman Thrombopoietin,TPO ELISA kit 人血小板生成素(TPO)ELISA KitELISA. 96T/48THuman Leukemia inhibitory factor,LIF ELISA kit 人白血病抑制因子(LIF)ELISA KitELISA. 96T/48THuman Salusin α ELISA Kit人Salusin-α ELISA KitELISA. 96T/48Thuman Insulin receptor substrate 2,IRS-2 ELISA Kit人胰島素受體底物2(IRS-2)ELISA KitELISA. 96T/48THuman transthyretin,TTR ELISA Kit人轉甲狀腺素蛋白(TTR)ELISA KitELISA. 96T/48THuman advanced oxidation protein products,AOPP ELISA Kit人晚期氧化蛋白產物(AOPP)ELISA KitELISA. 96T/48THuman islet amyloid polypeptide,IAPP ELISA Kit人胰島淀粉樣多肽(IAPP)ELISA KitELISA. 96T/48THuman glycosylated serum protein,GSP ELISA Kit人糖化蛋白(GSP)ELISA Kit ELISA. 96T/48THuman Glycated Albumin,GA ELISA Kit人糖化白蛋白(GA)ELISA KitELISA. 96T/48THuman Thyroxine-Binding Globulin Assay,TBG ELISA Kit人甲狀腺結合球蛋白(TBG)ELISA KitELISA. 96T/48THuman advanced glycation end products,AGEs ELISA Kit人晚期糖基化終末產物(AGEs)ELISA KitELISA. 96T/48THuman C-Polypeptide,CP ELISA Kit人C多肽(CP) ELISA KitELISA. 96T/48THuman Receptor for advanced glycation end products, RAGE/AGER ELISA Kit人晚期糖基化終末產物受體(RAGE/AGER)ELISA KitELISA. 96T/48THuman Glucagon,GC ELISA Kit人胰高血糖素(GC)ELISA Kit ELISA. 96T/48THuman Pancreatic Polypeptide,PP ELISA Kit人胰多肽(PP)ELISA KitELISA. 96T/48THuman insulin autoantibodies,IAA ELISA Kit人胰島素自身抗體(IAA)ELISA KitELISA. 96T/48THuman glutamic acid decarboxylase,GAD ELISA Kit人谷氨酸脫羧酶(GAD)ELISA KitELISA. 96T/48THuman Thymopentin,TP-5 ELISA Kit人胸腺五肽(TP-5)ELISA KitELISA. 96T/48THuman Thymosin ELISA Kit人胸腺肽(Thymosin)ELISA KitELISA. 96T/48THuman Non-Phosphorylated Insulin-like growth factor binding protein 1 ELISA Kit人未磷酸化類胰島素生長因子結合蛋白-1ELISA Kit ELISA. 96T/48THuman parathyroid hormone-like protein,PLP ELISA Kit人甲狀旁腺激素樣蛋白(PLP)ELISA KitELISA. 96T/48THuman visfatin ELISA Kit 人內脂素/內臟脂肪素(visfatin)ELISA KitELISA. 96T/48THuman apelin 12,AP12 ELISA Kit人apelin 12(AP12)ELISA KiELISA. 96T/48THuman Glucose dependent insulin releasing polypeptide,GIP ELISA Kit人葡萄糖依賴性胰島素釋放多肽(GIP)ELISA KitELISA. 96T/48THuman Proinsulin,PI ELISA Kit人胰島素原(PI)ELISA KitELISA. 96T/48THuman Insulin Receptor β,ISR-β ELISA KIT人胰島素受體β(ISR-β)ELISA KitELISA. 96T/48THuman Glycated hemoglobin A1c,GHbA1c ELISA Kit人糖化血紅蛋白A1c(GHbA1c)ELISA KitELISA. 96T/48THuman ghcagons-like pepfide 1,GLP-1 ELISA Kit人胰高血糖素樣肽1(GLP-1)ELISA KitELISA. 96T/48Thuman thyroid stimulating immunoglobulin,TSI ELISA Kit人甲狀腺刺激免疫球蛋白(TSI)ELISA KitELISA. 96T/48Thuman Parathyroid hormone,PTH ELISA Kit人甲狀旁腺激素(PTH)ELISA KitELISA. 96T/48Thuman Prostaglandin D2-methoxime,PGD2-MOX ELISA KIT人甲肟前列腺素D2(PGD2-MOX)ELISA KitELISA. 96T/48Thuman Ultrasensitivity Thyroxine,u-T4 ELISA Kit人高敏甲狀腺素(u-T4)ELISA KitELISA. 96T/48Thuman ultrasensitive thyroid-stimulating hormone,U-TSH ELISA Kit人高靈敏度促甲狀腺激素(U-TSH)ELISA KitELISA. 96T/48Thuman dopamine,DA ELISA KIT人多巴胺(DA)ELISA KitELISA. 96T/48Thuman Azidothymidine,AZT ELISA Kit人疊氮胸苷(AZT)ELISA KitELISA. 96T/48Thuman adrencocorticotropic hormone,ACTH ELISA Kit人促腎上腺皮質激素(ACTH)ELISA KitELISA. 96T/48Thuman corticotropin releasing hormone,CRH ELISA Kit人促腎上皮質激素釋放激素(CRH)ELISA KitELISA. 96T/48THuman Thyroglobulin,TG ELISA Kit人甲狀腺球蛋白(TG)ELISA KitELISA. 96T/48THuman Eukaryotic translation initiation factor 3a,eIF3a ELISA Kit人真核翻譯起始因子3a(eIF3a)ELISA Kit ELISA. 96T/48THuman phospho-extracellular signal-regulated kinase,pERK ELISA Kit人磷酸化細胞外信號調節激酶(pERK)ELISA KitELISA. 96T/48THuman phospholamban,PLN ELISA Kit人受磷蛋白(PLN)ELISA KitELISA. 96T/48T
常見問題:
問:Elisa試劑盒的使用的方法是什么啊?
答:采用雙抗夾心法(目前暫行)
問:一個孔需要多少量的血清?
答:一個孔上樣量10-50微升。
問:未處理的樣本我需要郵寄多少的量?
答:每個孔需要100ul。
問:樣本怎么保存?
答:當天要用的樣本保存4℃
隔天樣本-20℃(近期一個月左右要用的樣本)
長期保存樣本-70℃(一年或者更長時間多久都可以用)
避免反復凍融。
問:小鼠乙酰膽堿Elisa試劑盒后期數據處理中空白的OD值有什么用?
答:可以將標準品和樣本的OD值同時減去空白的值進行計算,或者都不減,保持同一水平就行。
問:那我們算出來的ACH含量為什么出現負值?
答:說明個別樣本的濃度很低,當濃度接近第6個點的時候,直線方程就有可能計算出負值。
問:小鼠乙酰膽堿Elisa試劑盒,組織標本,切割標本后能用生理鹽水稀釋嗎?還有稀釋的倍數是多少?
答:生理鹽水也可以。加入量1:3那樣的。
問:我想問一下,標準品濃度與標準品吸光度值之間是不是線性回歸?檢測出來的吸光度很低一般都存在哪些原因?大部分在0.08左右?(大鼠5羥色胺(5-HT)Elisa試劑盒)
答:是線性回歸。檢測出來的值比較低,樣本、稀釋、操作等,原因很多,但只要在可操作范圍就行。
問:做出來的結果:標準品的吸光度呈線性回歸,但是樣品的吸光度都和本體吸光度值接近,正常未予干預的大鼠血漿都基本沒有5-HT表達,這是什么原因?(大鼠5羥色胺(5-HT)Elisa試劑盒)
答:原因是:樣本、稀釋、室控和機器操作等,原因都可能造成吸光度都和本體吸光度值接近。
試劑盒組成及試劑配制:
1.酶聯板(Assay plate ):一塊(96孔)。
2.標準品(Standard):2瓶(凍干品)。
3.樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4.生物素標記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5.辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6.生物素標記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7.辣根過氧化物酶標記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8.底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9.濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10.終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
用純化的抗體包被微孔板,制成固相載體,往包被抗該指標抗體的微孔中依次加入標本或標準品、生物素化的抗該指標抗體、HRP標記的親和素,經過徹底洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的該指標呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),計算樣品濃度。
人ELISA試劑盒注意事項:
1)試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
2)實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。
3)不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。
4)使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。
5)使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
6)洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
7)底物A應揮發,避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
8)加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
9)按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
抗體的酶標記方法及標記效果測定:良好的酶結合物取決于兩個條件:即高效價的抗體和高活性的酶。抗體的活性和純度對制備標記抗體至關重要,因為特異性免疫反應隨抗體活性和純度的增加而增強。在酶標記過程中,抗體的活性有所降低,故需要純度高、效價高及抗原親和力強的抗體球蛋白,最好使用親和層析提純的抗體,可提高敏感性,而且可稀釋使用,減少非特異性吸附。酶與抗體交聯,常用戊二醛法和過碘酸鹽氧化法。郭春祥建立的HRP標記抗體的改良過碘酸鈉法簡單易行,標記效果好,特別適用于實驗室的小批量制備。其標記程序為:將5μg HRP溶于0.5ml蒸餾水中,加入新鮮配制的0.06 mol/L的過碘酸鈉(NaIO4)水溶液0.5ml,混勻置4℃冰箱30分鐘 , 取出加入0.16mol/L的乙二醇水溶液0.5ml,室溫放置30分鐘后加入含5(g純化抗體的水溶液1ml,混勻并裝透析袋,以0.05mol/L、pH9.5的碳酸鹽緩沖液于4℃冰箱中慢慢攪拌透析6小時(或過夜)使之結合,然后吸出,加硼氫化鈉(NaBH4)溶液( 5(g/ml)0.2ml,置4℃冰箱2小時,將上述結合物混合液加入等體積飽和硫酸銨溶液,置4℃冰箱30分鐘后離心,將所得沉淀物溶于少許0.02mol/L、pH7.4PBS中,并對之透析過夜(4℃),次日離心除去不溶物,即得到酶標抗體,用0.02mol/L、pH7.4PBS稀至5ml,進行測定后,冷凍干燥或低溫保存。
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人ELISA試劑盒標本的采集及保存:
1.血清:全血標本請于室溫放置2小時或4℃后于1000 x g離心20分鐘,取上清即可檢測,或將標本放于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。
2.血漿:可用EDTA或肝素作為抗凝劑,標本采集后30分鐘內于2 - 8° C 1000 x g離心15分鐘,或將標本放于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。
3.細胞培養物上清或其它生物標本:1000 xg離心20分鐘,取上清即可檢測,或將標本放于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。
注:標本溶血會影響最后檢測結果,因此溶血標本不宜進行此項檢測。
標本的稀釋原則:
首先通過文獻檢索的方式了解待測樣本的大致含量,確定適當的稀釋倍數。只有稀釋至標準曲線的范圍內,檢測的結果才是準確的。稀釋的過程中,應做好詳細的記錄。最后計算濃度時,稀釋了“N”倍,標本的濃度應再乘以“N”。
標準品的稀釋原則:2瓶,每瓶臨用前以樣品稀釋液稀釋至1ml,蓋好后靜置10分鐘以上,然后反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為300 pg/ml,做系列倍比稀釋后,分別稀釋300 pg/ml,150 pg/ml,75 pg/ml,37.5 pg/ml,18.5 pg/ml,9 pg/ml,4.5 pg/ml,樣品稀釋液直接作為標準濃度0 pg/ml,臨用前15分鐘內配制。
如配制150 pg/ml標準品:取0.5ml(不要少于0.5ml)300 pg/ml的上述標準品加入含0.5ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
生物素標記抗體的稀釋原則:
臨用前以生物素標記抗體稀釋液稀釋,稀釋前根據預先計算好的每次實驗所需的總量配制(每孔100μl),實際配制時應多配制0.1-0.2ml。如10μl生物素標記抗體加990μl生物素標記抗體稀釋液的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時內配制。
辣根過氧化物酶標記親和素的稀釋原則:
臨用前以辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液稀釋,稀釋前根據預先計算好的每次實驗所需的總量配制(每孔100μl),實際配制時應多配制0.1-0.2ml。如10μl辣根過氧化物酶標記親和素加990μl辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時內配制。
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人ELISA試劑盒產品優勢:
上海酶遠elisa試劑盒免費代測、送貨上門
運輸條件:低溫運輸,用干冰或者冰袋低溫運輸。
您于我公司購買產品后有任何疑問,都可以打電話給我公司業務員,我們會為您安排解決。在為了節省您寶貴的時間,我們還提供免費代實驗,只要你把樣品郵寄給我們,我們會在5-7個工作日內完成,并且保證結果。如果您對我們的ELISA試劑盒感興趣的話,您可通過QQ在線咨詢、郵箱咨詢、網站留言、電話撥打的方式與我們取得聯系,我們將竭誠為您服務,祝您工作愉快!
人ELISA試劑盒訂購流程:
1、您確認好了產品后可直接和我們在線聯系,或者是電話聯系,確認您購買的產品。
2、可以把您需要購買的產品確認好以郵件的形式發給我們,這樣您會在24小時內收到我們給您回復確認的郵件,或者是電話。
郵寄(免運費)產品:現貨一般當天定購,隔天由倉庫統一出貨;期貨會在出貨前由專人通知,倉庫備貨,依其產品性能,路途等選擇進行包裝郵寄,客戶如有特別要求,可與銷售人員提前溝通。
人1,3-βD葡葡糖苷酶(1,3-βD-Glu)酶聯免疫分析試劑盒說明書產品簡介:
本試劑盒用于測定人血清、血漿及相關液體樣本中 1,3-βD 葡葡糖苷酶(1,3-βD-Glu) 表達。
人1,3-βD葡葡糖苷酶(1,3-βD-Glu)酶聯免疫分析試劑盒說明書工作原理:
本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中人 1,3-βD 葡葡糖苷酶(1,3-βD-Glu)表達。用純化的 人 1,3-βD 葡葡糖苷酶(1,3-βD-Glu)抗體包被微孔板,制成固相抗體,可與樣品中 1,3-βD 葡葡糖苷酶(1,3-βD-Glu)相結合,經洗滌除去未結合的抗原和其他成分后再與 HRP 標記的 1,3-βD 葡葡糖苷酶(1,3-βD-Glu)抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經過徹底洗 滌后加底物 TMB 顯色。TMB 在 HRP 酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成最終 的黃色。用酶標儀在 450nm 波長下測定吸光度(OD 值),與 CUTOFF 值相比較,從而判定 標本中人 1,3-βD 葡葡糖苷酶(1,3-βD-Glu)的存在與否。
人1,3-βD葡葡糖苷酶(1,3-βD-Glu)酶聯免疫分析試劑盒產品規格: 1 | 30 倍濃縮洗滌液 | 20ml×1 瓶 | 7 | 終止液 | 6ml×1 瓶 |
2 | 酶標試劑 | 6ml×1 瓶 | 8 | 陽性對照 | 0.5ml×1 瓶 |
3 | 酶標包被板 | 12 孔×8 條 | 9 | 陰性對照 | 0.5ml×1 瓶 |
4 | 樣品稀釋液 | 6ml×1 瓶 | 10 | 說明書 | 1 份 |
5 | 顯色劑 A 液 | 6ml×1 瓶 | 11 | 封板膜 | 2 張 |
6 | 顯色劑 B 液 | 6ml×1/瓶 | 12 | 密封袋 | 1 個 |
1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能 馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融
2.不能檢測含 NaN3 的樣品,因 NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。 操作步驟
1. 編號:將樣品對應微孔按序編號,每板應設陰性對照 2 孔、陽性對照 2 孔、空白對照 1
孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)
2. 加樣:分別在陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照 50µl。然后在待測樣品孔先 加樣品稀釋液 40µl,然后再加待測樣品 10µl。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不 觸及孔壁,輕輕晃動混勻,
3. 溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
4. 配液:將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒后棄去,如此
重復 5 次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶標試劑 50µl,空白孔除外。
7. 溫育:操作同 3。
8. 洗滌:操作同 5。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑 A50µl,再加入顯色劑 B50µl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色
15 分鐘.
10. 終止:每孔加終止液 50µl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
11. 測定:以空白空調零,450nm 波長依序測量各孔的吸光度(OD 值)。 測定應在加終止 液后 15 分鐘以內進行。
計算和結果判定:
試驗有效性:陽性對照孔平均值≥1.00; 陰性對照平均值≤0.10 臨界值(CUT OFF)計算:臨界值=陰性對照孔平均值+0.15
陰性判定:樣品 OD 值< 臨界值(CUT OFF)者為 1,3-βD 葡葡糖苷酶(1,3-βD-Glu) 陰性
陽性判定:樣品 OD 值≥ 臨界值(CUT OFF)者為 1,3-βD 葡葡糖苷酶(1,3-βD-Glu)
陽性.
人1,3-βD葡葡糖苷酶(1,3-βD-Glu)酶聯免疫分析試劑盒注意事項:1.操作嚴格按照說明書進行,本試劑不同批號組分不得混用。
2.試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡 15-30 分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未 用完,板條應裝入密封袋中保存。
3.濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。
4. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
5.底物請避光保存。
6.試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準,使用雙波長檢測時,參考波長為 630nm
7.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。終止液為 2M 的硫酸,使用時必須 注意安全。
人1,3-βD葡葡糖苷酶(1,3-βD-Glu)酶聯免疫分析試劑盒儲存方式:1.試劑盒保存:;2-8℃。
2.有效期:6 個月
主要用途:通用型線粒體DNA的片段常見缺失(CD4977)定性分析試劑盒是一種旨在從動物細胞或組織中分離出完整而純化的線粒體細胞器的權威而經典的技術方法。該技術經過精心研制、成功實驗證明的。適合于動物軟組織(肝或腦組織)和培養細胞的線粒體的制備。其制備物產量高,可以被用于細胞凋亡、信號傳遞、能量代謝、蛋白組學和病理生理學等的研究。產品不含污染性蛋白酶和核酶,即到即用,性能穩定,分離產量和純度堪稱同類產品最佳。
通用型線粒體DNA的片段常見缺失(CD4977)定性分析試劑盒注意事項
1. 本產品為10次(1克動物組織或5 X 107細胞)或50次(200毫克動物組織或1 X 107細胞)操作
2. 實際操作的動物組織重量或細胞量與試劑使用量按比例調整:例如200毫克動物組織:試劑用量是標準用量的五分之一
3. 所有操作均須嚴格在4℃或以下狀態進行
4. 操作時,須戴手套
5. 操作時,須無菌操作,避免污染母液,尤其是裂解液(Reagent B)和保存液(Reagent E)
6. 建議使用足夠的樣品量
7. 建議嚴格控制操作時間
8. 通常勻化次數為20至40下(或細胞顆粒群/組織塊狀消失為止)達到80%的細胞裂解為理想狀態,但不同的組織或細胞類型會存在差異。用戶可以通過顯微鏡觀察3微升勻漿物的細胞裂解程度:完整細胞呈現發亮的圓環。低于50%可以增加勻化次數
9. 通常孵育5分鐘(不宜超過5分鐘)達到80%的細胞裂解為理想狀態,但不同的組織或細胞類型會存在差異。用戶可以通過顯微鏡觀察3微升裂解物的細胞裂解程度:完整細胞呈現發亮的圓環。低于50%可以增加孵育時間和渦旋震蕩次數
10. 對于難以裂解的細胞,例如HeLa細胞,采用物理勻漿法是優先推薦的技術處理
11. 通常1克動物組織或5 X 107細胞的線粒體含量為50微克以上線粒體蛋白
12. 如果需要計量線粒體,稀釋后數分鐘內完成,否則線粒體將分解
13. 本產品所獲得的線粒體純度和產量最為理想。通過調整10000g離心速度到3000至8000g,可以提高粗提的線粒體純化程度,但線粒體產量相應減少
14. 如果需要獲得99%以上純度的線粒體,使用動物細胞/組織高質純化線粒體分離試劑盒-GMS10006.3
15. 線粒體正常活性測定方法是: CITRATE SYNTHASE活性、氧化磷酸化、細胞色素吸收峰譜等
16. 線粒體內外膜完整測定方法是:CYTOCHROME C OXIDASE活性和熒光JC染色
17. 本公司提供線粒體套餐:ROS、NAO、MitoTRACK、JGB、線粒體溶解等
18. 本公司提供系列線粒體分析試劑產品
通用型線粒體DNA的片段常見缺失(CD4977)定性分析試劑盒質量標準
1. 本產品經鑒定性能穩定
2. 本產品經鑒定分離的線粒體內外膜完整
3. 本產品經鑒定分離的線粒體維持正常活性
4. 本產品經鑒定不含污染性蛋白酶和核酶
通用型線粒體DNA的片段常見缺失(CD4977)定性分析試劑盒 保存方式
保存凈化液(Reagent C)在-20℃冰箱里,其余的保存在4℃冰箱里,有效保證6月
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