NADP。NAD或者NADP作為輔酶參與了細胞生命正常活動中必不可少的氧化還原反應和電子傳遞。
正常生物體內NAD/NADH比率始終處于一個動態平衡的狀態,這個比率是一個可以反映出細胞的氧化還原狀態的非常重要的指標,由此可判定一個細胞的新陳代謝活性和細胞的健康與否。在健康的哺乳動物組織中,NAD/NADH的比率大約為700。艾美捷作為致力于為廣大的科研機構、高等院校等高端客戶提供高端的產品、技術支持與服務的科技公司,特別向您介紹細胞代謝研究的熱點領域NAD/NADH比率分析,包括便捷的比色法檢測以及更靈敏的熒光法檢測等不同的完整研究方案,以滿足您不同客戶的實驗條件。
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產品名稱及描述 | 品牌 | 貨號 | 產品說明 |
Amplite Fluorimetric NAD/NADH Ratio Assay Kit | AAT | AAT-15263 | 詳情 |
NAD/NADH Quantitation Colorimetric Kit | Biovision | K337-100 | 詳情 |
NAD+/NADH Cell-Based Assay Kit | Cayman | 600480-1 | 詳情 |
Amplite Colorimetric NADH Assay Kit | AAT | AAT-15271 | 詳情 |
Amplite Fluorimetric NADH Assay Kit | AAT | AAT-15261 | 詳情 |
Amplite Colorimetric Total NAD/NADH Assay Kit | AAT | AAT-15275 | 詳情 |
Amplite Fluorimetric Total NAD/NADH Assay Kit | AAT | AAT-15257 | 詳情 |
其中Amplite Fluorimetric NAD/NADH Ratio Assay Kit(貨號AAT-15263)產品是一款熒光法檢測NAD/NADH比率檢測試劑盒,具有很高的靈敏度。該檢測方法因為是在紅色可見光范圍內,能夠顯著地降低來自生物樣品本身的干擾。本檢測法顯現出高靈敏度和干擾小,在570nm處激發,發射光在590nm處,且能分別檢測出NAD、NADH和NAD/NADH比率。;而NAD/NADH Quantitation Colorimetric Kit(貨號K337-100)則是一款比色法檢測試劑盒,方便絕大多數實驗室使用,且操作方便,快捷。為您推薦的上述兩款試劑盒,均能檢測NAD、NADH以及NAD/NADH比率三個數據,具有無與倫比的性價比,絕對超值!實驗操作簡單,便捷,靈敏,特異性高,不與NADP發生交叉反應。
如果您希望進行較多樣本的高通量分析,或者希望直接在96孔細胞培養板上進行檢測,NAD+/NADH Cell-Based Assay Kit(貨號600480-1)則是合適的選擇。該試劑盒是將細胞培養在96孔板中,基于比色法于96孔板中完成整套實驗,最終得到NAD/NADH的比值。整個實驗操作簡單,尤其適用于高通量研究。稍顯遺憾的是,該試劑盒只能檢測NAD/NADH比率。 另外,艾美捷還向您推薦單獨檢測NADH,以及檢測總NAD/NADH的檢測試劑盒,同樣適用于比色法和熒光法,方便您根據自己的需求選擇合適的檢測方案。
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產品名稱及描述 | 品牌 | 貨號 | 產品說明 |
Amplite Fluorimetric NAD/NADH Ratio Assay Kit | AAT | AAT-15263 | 詳情 |
NAD/NADH Quantitation Colorimetric Kit | Biovision | K337-100 | 詳情 |
NAD+/NADH Cell-Based Assay Kit | Cayman | 600480-1 | 詳情 |
Amplite Colorimetric NADH Assay Kit | AAT | AAT-15271 | 詳情 |
Amplite Fluorimetric NADH Assay Kit | AAT | AAT-15261 | 詳情 |
Amplite Colorimetric Total NAD and NADH Assay Kit | AAT | AAT-15275 | 詳情 |
Amplite Fluorimetric Total NAD and NADH Assay Kit | AAT | AAT-15257 | 詳情 |
除了NAD/NADH定量與比率分析試劑盒外,艾美捷還向您推薦其它商業化的試劑盒產品,包括NADP/NADPH定量及比率分析,以及其它涉及葡萄糖代謝、糖酵解途徑、丙酮酸代謝、乳酸代謝等其它細胞代謝的相關分析試劑盒,為客戶的科研加油助力!
艾美捷能為您尋找并提供最優的產品解決方案!包括檢測各種檢測分析試劑盒、相關特色抗體、重組蛋白及細胞因子和酶等多種產品,以及其他創新的研究工具。其產品覆蓋細胞凋亡研究、能量代謝、細胞/組織蛋白提取、氧化應激與損傷、代謝與肥胖癥、細胞增殖與毒性、信號轉導、干細胞研究等領域。艾美捷致力于研究者們提供最好、最新的細胞生物學研究工具而不斷擴大產品及服務質量。如果您對上述產品感興趣,請致電免費客戶專線到艾美捷科技有限公司垂詢相關的產品信息及完整實驗解決方案。
武漢艾美捷科技有限公司(Amyjet Scientific Inc)
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地址:武漢市洪山區雄楚大道450號名都花園111座1單元7A
網址:http://www.bio-review.com(文章來源)
數量:大量保質期:一年保存條件:常溫保存規格:250 T
酵母與原核之間在重組蛋白的生產成本上的比較要看具體情況。過氧化氫定量分析試劑盒(水兼容性)傳統的釀酒酵母與大腸桿菌相比產量多數情況下處于劣勢。但畢赤酵母高密發酵特性突出,表達量則常常超過大腸桿菌系統,如果實現高效分泌表達,則純化成本非常低,具有生產成本優勢。但畢赤酵母的胞內表達在純化方面則不一定有優勢。
過氧化氫定量分析試劑盒(水兼容性)除了用于規模化生產重組蛋白之外,畢赤酵母還在基礎研究方面發揮著重要 作用,比如表達蛋白用于結構分析,信號傳導途徑研究,當然也包括酶學研究。用酵母或原核系統對于活性未知的酶進行研究的例子少,一般酶活鑒定往往是用天然的蛋白解決的。
如果需要,完全可以利用畢赤酵母進行酶活性的探索,從以往的戰績來看,畢赤酵母表達表達成功的例子實在是太多了,過氧化氫定量分析試劑盒(水兼容性)比例也很高,雖然仍存在風險。
1)原核誘導時間,從你的結果來看,誘導1-5小時變化不大,時間點影響較小,取3小時沒有問題。很多情況下,溫度對可溶性影響較大,不知道你30度誘導的可溶性如何?如果蛋白主要是可溶性的,那進一步降低誘導溫度的意義也就小了。如果仍有較多的包含體,過氧化氫定量分析試劑盒(水兼容性)倒是可以再降低一下誘導溫度。此外,很多蛋白包含體復性后有活性,如果可溶性表達困難或表達量太低,仍可以考慮包含體復性策略。
2)酵母細胞的破壁可以采用機械法,也可以采用酶法。機械法主要是高壓勻質和珠磨,主要用于中試和生產,但有的儀器也可以兼顧實驗室規模,這兩種方法效率較高。酶法主要用于制備球形體,是一種外源基因高效轉化的方法,過氧化氫定量分析試劑盒(水兼容性)但用于破壁檢測表達則成本太高,此外使用酶破壁也會引入雜蛋白。我查過一篇文獻,是小量裂截用于表達檢測的,我沒有直接作過,但我們實驗室的研究生反映還可以。
DL marker系列
ZM402-1DL15000(條帶:250.1000.2500.5000.7500.10000.15000)50TZOMANBIO
ZM402-2DL15000(條帶:250.1000.2500.5000.7500.10000.15000)500TZOMANBIO
ZM403-1DL15000 Plus(條帶250.500.1000.1500.2500.4000.5000.7500.10000.15000)50TZOMANBIO
ZM403-2DL15000 Plus (條帶250.500.1000.1500.2500.4000.5000.7500.10000.15000)500TZOMANBIO
ZM404-1DL2000(條帶100.250.500.750.1000.2000)50TZOMANBIO
ZM404-2DL2000(條帶100.250.500.750.1000.2000)1000TZOMANBIO
ZM405-1DL2000 Plus (條帶100.250.500.750.1000.2000.3000.5000)50TZOMANBIO
ZM405-2DL2000 Plus (條帶100.250.500.750.1000.2000.3000.5000)500TZOMANBIO
酶切類marker系列
牛乳鐵傳遞蛋白(LF/LTF)酶聯免疫分析
試劑盒使用說明書
本試劑僅供研究使用 目的:本試劑盒用于測定牛血清,血漿及相關液體樣本中乳鐵傳遞蛋白(LF/LTF)的含量。
實驗原理:
本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中牛乳鐵傳遞蛋白(LF/LTF)水平。用純化的牛乳鐵傳遞蛋白(LF/LTF)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入乳鐵傳遞蛋白(LF/LTF)再與HRP標記的乳鐵傳遞蛋白(LF/LTF)抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的乳鐵傳遞蛋白(LF/LTF)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中牛乳鐵傳遞蛋白(LF/LTF)濃度。
試劑盒組成:
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| (20ml×20倍)×1瓶 | | |
樣本處理及要求:
1. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如出現沉淀,應再次離心。
2. 血漿:應根據標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應該再次離心。
3. 尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。
4. 細胞培養上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
5. 組織標本:切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
6. 標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融.
7. 不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
操作步驟:
1. 標準品的稀釋與加樣:在酶標包被板上設標準品孔10孔,在第一、第二孔中分別加標準品100μl,然后在第一、第二孔中加標準品稀釋液50μl,混勻;然后從第一孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為1500μg/L,1000μg/L ,500μg/L,250μg/L, 125μg/L)。
2. 加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4. 配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。
7. 溫育:操作同3。
8. 洗滌:操作同5。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
11. 測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行。
注意事項:
1. 試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。
2. 濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。
3. 各步加樣均應使用加樣器,并經常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間最好控制在5分鐘內,如標本數量多,推薦使用排槍加樣。
4. 請每次測定的同時做標準曲線,最好做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本OD值大于標準品孔第一孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(n倍)后再測定,計算時請最后乘以總稀釋倍數(×n×5)。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6. 底物請避光保存。
7. 嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.
8. 所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
9. 本試劑不同批號組分不得混用。
10. 如與英文說明書有異,以英文說明書為準。
計算:
以標準物的濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,
在坐標紙上繪出標準曲線,根據樣品的OD
值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋
倍數;或用標準物的濃度與OD值計算出標
準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值
代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋
倍數,即為樣品的實際濃度。
(此圖僅供參考)
試劑盒性能:
1.樣品線性回歸與預期濃度相關系數R值為0.95以上。
2.批內與批間應分別小于9%和11%
檢測范圍:
100μg/L -2000μg/L
保存條件及有效期:
1.試劑盒保存:;2-8℃。
2.有效期:6個月
試劑盒使用說明書
本試劑盒僅供研究使用。
檢測范圍: 96T
6 ng/L -180ng/L
人1,25二羥基維生素D3(1,25-(OH)2D3)酶聯免疫分析試劑盒實驗原理
本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中人1,25二羥基維生素D3(1,25-(OH)2D3)水平。用純化的人1,25二羥基維生素D3(1,25-(OH)2D3)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入1,25二羥基維生素D3(1,25-(OH)2D3),再與HRP標記的1,25二羥基維生素D3(1,25-(OH)2D3)抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的1,25二羥基維生素D3(1,25-(OH)2D3)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中人1,25二羥基維生素D3(1,25-(OH)2D3)濃度。
人1,25二羥基維生素D3(1,25-(OH)2D3)酶聯免疫分析試劑盒試劑盒組成
1 | 30倍濃縮洗滌液 | 20ml×1瓶 | 7 | 終止液 | 6ml×1瓶 |
2 | 酶標試劑 | 6ml×1瓶 | 8 | 標準品(320 ng/L) | 0.5ml×1瓶 |
3 | 酶標包被板 | 12孔×8條 | 9 | 標準品稀釋液 | 1.5ml×1瓶 |
4 | 樣品稀釋液 | 6ml×1瓶 | 10 | 說明書 | 1份 |
5 | 顯色劑A液 | 6ml×1瓶 | 11 | 封板膜 | 2張 |
6 | 顯色劑B液 | 6ml×1/瓶 | 12 | 密封袋 | 1個 |
標本要求
1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融
2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
人1,25二羥基維生素D3(1,25-(OH)2D3)酶聯免疫分析試劑盒操作步驟
1. 標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。
160 ng/L | 5號標準品 | 150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液 |
80 ng/L | 4號標準品 | 150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液 |
40 ng/L | 3號標準品 | 150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液 |
20 ng/L | 2號標準品 | 150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液 |
10 ng/L | 1號標準品 | 150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液 |
2. 加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4. 配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。
7. 溫育:操作同3。
8. 洗滌:操作同5。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
11. 測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行。
操作程序總結:
計算
以標準物的濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋倍數;或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數,即為樣品的實際濃度。
注意事項
1.試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。
2.濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。
3.各步加樣均應使用加樣器,并經常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間最好控制在5分鐘內,如標本數量多,推薦使用排槍加樣。
4. 請每次測定的同時做標準曲線,最好做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本OD值大于標準品孔第一孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(n倍)后再測定,計算時請最后乘以總稀釋倍數(×n×5)。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物請避光保存。
7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.
8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
9.本試劑不同批號組分不得混用。
10. 如與英文說明書有異,以英文說明書為準。
保存條件及有效期
1.試劑盒保存:;2-8℃。
2.有效期:6個月
小鼠肌酸激酶(CK)酶聯免疫分析試劑盒使用說明書本試劑盒僅供體外研究使用(010-57269780 QQ:1261299569聯系人:劉經理) 預期應用ELISA法定量測定小鼠血清、血漿、細胞培養上清或其它相關生物液體中肌酸激酶(CK)含量。 實驗原理用純化的抗體包被微孔板,制成固相載體,往包被抗CK抗體的微孔中依次加入標本或標準品、生物素化的抗CK抗體、HRP標記的親和素,經過徹底洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的CK呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),計算樣品濃度。 試劑盒組成及試劑配制 1. 酶聯板:一塊(96孔) 2. 標準品(凍干品):2瓶,每瓶臨用前以樣品稀釋液稀釋至1ml,蓋好后靜置10分鐘以上,然后反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為400 U/L,做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋)后,分別稀釋400 U/L,200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,樣品稀釋液直接作為標準濃度0 U/L,臨用前15分鐘內配制。如配制200 U/L標準品:取0.5ml(不要少于0.5ml)400 U/L的上述標準品加入含有0.5ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。3. 樣品稀釋液:1×20ml/瓶。4. 檢測稀釋液A:1×10ml/瓶。5. 檢測稀釋液B:1×10ml/瓶。6. 檢測溶液A:1×120ul/瓶(1:100)臨用前以檢測稀釋液A 1:100稀釋,稀釋前根據預先計算好的每次實驗所需的總量配制(每孔100ul),實際配制時應多配制0.1-0.2ml。如10ul檢測溶液A加990ul檢測稀釋液A的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時內配制。7. 檢測溶液B:1×120ul/瓶(1:100)臨用前以檢測稀釋液B 1:100稀釋。稀釋方法同檢測溶液A。8. 底物溶液:1×10ml/瓶。 9. 濃洗滌液:1×30ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。 10. 終止液:1×10ml/瓶(2N H2SO4)。11. 覆膜:1×5張
特異性 本試劑盒可同時檢測重組或天然的小鼠肌酸激酶(CK),且與其它相關蛋白無交叉反應。
計算 以標準物的濃度為橫坐標(對數坐標),OD值為縱坐標(普通坐標),在半對數坐標紙上繪出標準曲線(推薦使用專業制作曲線軟件進行分析,如curve expert 1.3),根據樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度,再乘以稀釋倍數;或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數,即為樣品的實際濃度。
注意事項1. 洗滌過程非常重要,不充分的洗滌易造成假陽性。2. 一次加樣時間最好控制在5分鐘內,如標本數量多,推薦使用多道移液器加樣。3. 請每次測定的同時做標準曲線,最好做復孔。4. 如標本中待測物質含量過高,請先稀釋后再測定,計算時請最后乘以稀釋倍數。5. 在配制標準品、檢測溶液工作液時,請以相應的稀釋液配制,不能混淆。6. 底物請避光保存。
檢測范圍:6.25 U/L - 400 U/L
最低檢測限:1.56 U/L
說明 1. 在儲存及孵育過程中避免將試劑暴露在強光中。所有試劑瓶蓋須蓋緊以防止蒸發和污染,試劑避免受到微生物的污染,因為蛋白水解酶的干擾將導致出現錯誤的結果。2. 小心吸取試劑并嚴格遵守給定的孵育時間和溫度。請注意在吸取標本 / 標準品,酶結合物或底物時,第一個孔與最后一個孔加樣之間的時間間隔如果太大,將會導致不同的 “預孵育”時間,從而明顯地影響到測量值的準確性及重復性。而且,洗滌不充分將影響試驗結果。3. 試劑盒保存:部分試劑保存于-20℃,部分試劑保存于2-8℃,具體以標簽上的標示為準。4. 濃洗滌液會有鹽析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶。 5. 剛開啟的酶聯板孔中可能會含有少許水樣物質,此為正常現象,不會對實驗結果造成任何影響。 6. 中、英文說明書可能會有不一致之處,請以英文說明書為準。7. 所有的樣品都應管理好,按照規定的程序處理樣品和檢測裝置。8. 有效期:6個月
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小鼠谷胱甘肽-過氧化物酶(GSH-PX)酶聯免疫分析
試劑盒使用說明書
本試劑僅供研究使用 目的:本試劑盒用于測定小鼠血清,血漿及相關液體樣本中谷胱甘肽-過氧化物酶(GSH-PX)的含量。
實驗原理:
本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中小鼠谷胱甘肽-過氧化物酶(GSH-PX)水平。用純化的小鼠谷胱甘肽-過氧化物酶(GSH-PX)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中加入谷胱甘肽-過氧化物酶,再與HRP標記的GSH-PX抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經過洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的谷胱甘肽-過氧化物酶呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中小鼠谷胱甘肽-過氧化物酶(GSH-PX)的含量。
試劑盒組成:
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| (20ml×20倍)×1瓶 | | |
樣本處理及要求:
1. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如出現沉淀,應再次離心。
2. 血漿:應根據標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應該再次離心。
3. 尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。
4. 細胞培養上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
5. 組織標本:切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
6. 標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融.
7. 不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
操作步驟:
1. 標準品的稀釋與加樣:在酶標包被板上設標準品孔10孔,在、第二孔中分別加標準品100μl,然后在、第二孔中加標準品稀釋液50μl,混勻;然后從孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為600U/L,400 U/L ,200 U/L,100 U/L,50 U/L)。
2. 加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4. 配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。
7. 溫育:操作同3。
8. 洗滌:操作同5。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
11. 測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行。
注意事項:
1. 試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。
2. 濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。
3. 各步加樣均應使用加樣器,并經常校對其性,以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內,如標本數量多,推薦使用排槍加樣。
4. 請每次測定的同時做標準曲線,做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本OD值大于標準品孔孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(n倍)后再測定,計算時請乘以總稀釋倍數(×n×5)。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6. 底物請避光保存。
7. 嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.
8. 所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
9. 本試劑不同批號組分不得混用。
10. 如與英文說明書有異,以英文說明書為準。
計算:
以標準物的濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,
在坐標紙上繪出標準曲線,根據樣品的OD
值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋
倍數;或用標準物的濃度與OD值計算出標
準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值
代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋
倍數,即為樣品的實際濃度。
(此圖僅供參考)
試劑盒性能:
1.樣品線性回歸與預期濃度相關系數R值為0.990以上。
2.批內與批見應分別小于9%和11%
檢測范圍:
15U/L -700 U/L
保存條件及期:
1.試劑盒保存:;2-8℃。
2.期:6個月
貨號:JW-S51364
規格:5次
檢測樣本:動物和人相關組織樣本
保存條件:低溫保存
庫存數量:大量
品牌:極威生物
供應商:上海極威生物科技有限公司
溫馨提示:不可用于臨床治療
植物葡萄糖6-磷酸異構酶(glucose-6-phosphate isomerase;GPI)電泳分析試劑盒訂購事項:
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注:本產品僅供科研使用,不得用于其他用途,禁止用于臨床。
植物葡萄糖6-磷酸異構酶(glucose-6-phosphate isomerase;GPI)電泳分析試劑盒及極威生物長期供應產品種類:
長期為廣大高校及醫院等科研單位供應各類產品試劑,產品種類齊全,包括:elisa試劑盒,細胞株,標準品,生物試劑,蛋白分子類,免疫學類,生物化學類,其中生物化學技術相關試劑類別如下:ATP酶活性定量試劑專題、甲戊二羥酸(MEVALONATE)通路分析試劑專題、乙酰化分析試劑專題、組織生物化學成分定量檢測試劑專題、脂類成分定量檢測試劑專題、金屬元素定量檢測試劑專題、脂肪酸β氧化檢測試劑專題、脂類代謝檢測試劑專題、膠原蛋白(collagen)代謝檢測試劑專題、PH檢測試劑專題等
極威生物產品使用承諾
上海極威生物有限公司秉著“極致追求,科學權威,客戶滿意,質量承諾”的宗旨為我們的廣大科研用戶提供優質產品和服務。用戶收到貨后,應按照產品說明書上的規定妥善保管并在有效期內使用。我們的產品在銷售前已作嚴格的質量鑒定,保證說明書所述的使用效果。在貨到后10天內若發現確屬本產品的質量問題,請立即以書面形式(實驗報告)與本公司聯系,并將該產品退回,經檢驗確系產品質量所致,本公司負責更換產品。如系使用者錯誤操作所致,本公司不承擔由此造成的損失。
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