牛山梨醇脫氫酶(SDH)elisa試劑盒免費代測
簡介:
有效期:6個月
預期應用:ELISA法定量測定血清、血漿、細胞培養上清或其它相關生物液體中的含量。
保存溫度:2-8℃低溫保存
用途:科研實驗等領域科學研究,不得用于臨床診斷
應用領域:
科研項目實驗
操作流程:
稀釋——加樣——溫育——配液——洗滌——加酶——溫育——洗滌——顯色——終止——測定
常見問題:
參數規格:48T/96T
產品資料:有PDF形式、WORD形式說明書
產品優勢:靈敏度高、重復性強
儲存方式:2-8攝氏度(保存到冰箱里就行)
標本的采集及保存:
1.血清:全血標本請于室溫放置2小時或4℃后于1000 x g離心20分鐘,取上清即可檢測,或將標本放于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。
2.血漿:可用EDTA或肝素作為抗凝劑,標本采集后30分鐘內于2 - 8° C 1000 x g離心15分鐘,或將標本放于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。
3.細胞培養物上清或其它生物標本:1000 x g離心20分鐘,取上清即可檢測,或將標本放于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。
注:標本溶血會影響最后檢測結果,因此溶血標本不宜進行此項檢測。
牛山梨醇脫氫酶(SDH)elisa試劑盒免費代測
標本的稀釋原則:
首先通過文獻檢索的方式了解待測樣本的大致含量,確定適當的稀釋倍數。只有稀釋至標準曲線的范圍內,檢測的結果才是準確的。稀釋的過程中,應做好詳細的記錄。最后計算濃度時,稀釋了“N”倍,標本的濃度應再乘以“N”。
標準品的稀釋原則:2瓶,每瓶臨用前以樣品稀釋液稀釋至1ml,蓋好后靜置10分鐘以上,然后反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為300 pg/ml,做系列倍比稀釋后,分別稀釋300 pg/ml,150 pg/ml,75 pg/ml,37.5 pg/ml,18.5 pg/ml,9 pg/ml,4.5 pg/ml,樣品稀釋液直接作為標準濃度0 pg/ml,臨用前15分鐘內配制。
如配制150 pg/ml標準品:取0.5ml(不要少于0.5ml)300 pg/ml的上述標準品加入含0.5ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
生物素標記抗體的稀釋原則:
臨用前以生物素標記抗體稀釋液稀釋,稀釋前根據預先計算好的每次實驗所需的總量配制(每孔100μl),實際配制時應多配制0.1-0.2ml。如10μl生物素標記抗體加990μl生物素標記抗體稀釋液的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時內配制。
辣根過氧化物酶標記親和素的稀釋原則:
臨用前以辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液稀釋,稀釋前根據預先計算好的每次實驗所需的總量配制(每孔100μl),實際配制時應多配制0.1-0.2ml。如10μl辣根過氧化物酶標記親和素加990μl辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時內配制。
操作步驟:
實驗開始前,請提前配置好所有試劑,試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。每次檢測都應該做標準曲線。如樣品濃度過高時,用樣品稀釋液進行稀釋,以使樣品符合試劑盒的檢測范圍。
1.加樣:分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔?瞻卓准訕悠废♂屢100μl,余孔分別加標準品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標板加上蓋或覆膜,37℃反應120分鐘。
為保證實驗結果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。
2.棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加生物素標記抗體工作液 100μl(取1μl生物素標記抗體加99μl生物素標記抗體稀釋液的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時內配制),37℃,60分鐘。
3.溫育60分鐘后,棄去孔內液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。
4.每孔加辣根過氧化物酶標記親和素工作液(同生物素標記抗體工作液) 100μl,37℃,60分鐘。
5.溫育60分鐘后,棄去孔內液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。
6.依序每孔加底物溶液90μl,37℃避光顯色(30分鐘內,此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度藍色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7.依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結果的準確性,底物反應時間到后應盡快加入終止液。
8.用酶聯儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。 在加終止液后15分鐘以內進行檢測。
注:
1. 用戶在初次使用試劑盒時,應將各種試劑管離心數分鐘,以便試劑集中到管底。
2. 每次實驗留一孔作為空白調零孔,該孔不加任何試劑,只是最后加底物溶液及2N H2SO4。測量時先用此孔調OD值至零。
3. 為防止樣品蒸發,試驗時將反應板放于鋪有濕布的密閉盒內,酶標板加上蓋或覆膜。
4. 未使用完的酶標板或者試劑,請于2-8℃保存。標準品、生物素標記抗體工作液、辣根過氧化物酶標記親和素工作液請依據所需的量配置使用。請勿重復使用已稀釋過的標準品、生物素標記抗體工作液或、辣根過氧化物酶標記親和素工作液。
5. 建議檢測樣品時均設雙孔測定,以保證檢測結果的準確性。
我公司供應的酶聯免疫試劑盒具有方便性,與國內其它生產商相比,檢測抗體和HRP酶我公司產品中提供直接的稀釋液,直接加樣,免去了客戶自己從高濃度向低濃度稀釋;底物部分,上海酶遠劑盒產品中配置進口單組分TMB,免去客戶用雙組分時用前的混合步驟。
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產品名稱:人山梨醇脫氫酶(SDH)elisa試劑盒
英文名:Human sorbitol dehydrogenase,SDH Elisa Kit
貨號: JW-S13633
種屬:人
種類:人ELISA試劑盒
規格:48人份/96人份
保存條件:2-8℃。
有效期:6個月
使用方法:可索要說明書,按照說明書進行實驗
用途:用于科研實驗檢測,不得用于臨床診斷
人山梨醇脫氫酶(SDH)ELISA試劑盒產品服務介紹:
一、購買試劑盒可免費提供代測服務
二、可提供實驗技術指導
三、嚴格要求產品生產質量,如有質量問題(非人為因素)免費包退換貨
四、公司所供應的ELISA試劑盒具有以下獨特優點:
1、全部采用原裝進口抗體——高效、靈敏、特異
2、全部規范包被操作——吸附均勻,吸附性好,空白值低,孔底透明度高
3、采用先進的優化方案——重復性高,可靠性強
5、技術團隊服務要求:專業,規范,高效
6、可檢測樣本:適用于體液、組織勻漿液、細胞培養上清液、尿液等多種類型的樣本
人山梨醇脫氫酶(SDH)ELISA試劑盒樣品收集、處理及保存方法:
1、 血清:使用不含熱原和內毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000轉離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2、 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉離心30分鐘取上清。
3、 細胞上清液:3000轉離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4、 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉離心10分鐘取上清。
5、 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
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牛ELISA試劑盒簡介:
規格:96T/48T
保存條件:2-8℃(頻繁使用時);-20℃(較長時間不用時)
特點:靈敏性高、特異性強、重復性好
種屬:人、大鼠、小鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、羊、雞、鴨、魚等。
運輸:快遞運輸,可根據客戶要求,選擇具體的運輸方式
牛ELISA試劑盒產品優勢:
一、高效、靈敏、特異的抗體;
二、穩定的重復性和可靠性;
三、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相載體;
四、適用血清、血漿、組織勻漿液、細胞培養上清液、尿液等等多種標本類型;
五、可檢測指標齊全:細胞因子檢測、心肌梗塞檢測、內分泌檢測、肝纖維化檢測、自身免疫檢測、腫瘤標志物檢測、傳染病檢測、特種蛋白檢測、優生優育檢測等等;
六、價格優惠,質量保證,最大限度的節省實驗經費。
牛ELISA試劑盒實驗流程:
1. 實驗前標準品、試劑及樣本的準備;
2. 加樣(標準品及樣本)100μL,37°C孵育1小時;
3. 吸棄,加檢測溶液A100μL,37°C孵育1小時;
4. 洗板3次;
5. 加檢測溶液B100μL,37°C孵育30分鐘;
6. 洗板5次;
7. 加TMB底物90μL,37°C孵育15-25分鐘;
8. 加終止液50μL,立即450nm讀數。
標本的采集及保存:
1.血清:全血標本請于室溫放置2小時或4℃后于1000 x g離心20分鐘,取上清即可檢測,或將標本放于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。
2.血漿:可用EDTA或肝素作為抗凝劑,標本采集后30分鐘內于2 - 8° C 1000 x g離心15分鐘,或將標本放于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。
3.細胞培養物上清或其它生物標本:1000 xg離心20分鐘,取上清即可檢測,或將標本放于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。
注:標本溶血會影響最后檢測結果,因此溶血標本不宜進行此項檢測。
標本的稀釋原則:
首先通過文獻檢索的方式了解待測樣本的大致含量,確定適當的稀釋倍數。只有稀釋至標準曲線的范圍內,檢測的結果才是準確的。稀釋的過程中,應做好詳細的記錄。最后計算濃度時,稀釋了“N”倍,標本的濃度應再乘以“N”。
標準品的稀釋原則:2瓶,每瓶臨用前以樣品稀釋液稀釋至1ml,蓋好后靜置10分鐘以上,然后反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為300 pg/ml,做系列倍比稀釋后,分別稀釋300 pg/ml,150 pg/ml,75 pg/ml,37.5 pg/ml,18.5 pg/ml,9 pg/ml,4.5 pg/ml,樣品稀釋液直接作為標準濃度0 pg/ml,臨用前15分鐘內配制。
如配制150 pg/ml標準品:取0.5ml(不要少于0.5ml)300 pg/ml的上述標準品加入含0.5ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
生物素標記抗體的稀釋原則:
臨用前以生物素標記抗體稀釋液稀釋,稀釋前根據預先計算好的每次實驗所需的總量配制(每孔100μl),實際配制時應多配制0.1-0.2ml。如10μl生物素標記抗體加990μl生物素標記抗體稀釋液的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時內配制。
辣根過氧化物酶標記親和素的稀釋原則:
臨用前以辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液稀釋,稀釋前根據預先計算好的每次實驗所需的總量配制(每孔100μl),實際配制時應多配制0.1-0.2ml。如10μl辣根過氧化物酶標記親和素加990μl辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時內配制。
ELISA(酶聯免疫吸附試驗,酶聯免疫試劑盒)方法的基本原理是酶分子與抗體或抗抗體分子共價結合,此種結合不會改變抗體的免疫學特性,也不影響酶的生物學活性。此種酶標記抗體可與吸附在固相載體上的抗原或抗體發生特異性結合。滴加底物溶液后,底物可在酶作用下使其所含的供氫體由無色的還原型變成有色的氧化型,出現顏色反應。因此,可通過底物的顏色反應來判定有無相應的免疫反應,顏色反應的深淺與標本中相應抗體或抗原的量呈正比。此種顯色反應可通過ELISA(酶聯免疫吸附試驗,酶聯免疫試劑盒)檢測儀進行定量測定,這樣就將酶化學反應的敏感性和抗原抗體反應的特異性結合起來,使ELISA(酶聯免疫吸附試驗,酶聯免疫試劑盒)方法成為一種既特異又敏感的檢測方法。
牛ELISA試劑盒實驗原理:
將轉化生長因子β2 (TGFb2)抗體包被于96孔微孔板中,制成固相載體,向微孔中分別加入標準品或標本,其中的轉化生長因子β2 (TGFb2)與連接于固相載體上的抗體結合,然后加入生物素化的轉化生長因子β2 (TGFb2)抗體,將未結合的生物素化抗體洗凈后,加入HRP標記的親和素,再次徹底洗滌后加入TMB底物顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的轉化生長因子β2 (TGFb2)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(O.D.值),計算樣品濃度。
牛山梨醇脫氫酶(SDH)elisa試劑盒操作方法
牛ELISA試劑盒獨具特點:
1. 靈敏,準確和一致的性能;
2. 用血清、血漿、組織培養上清或裂解產物進行過驗證;
3. 在半天內可完成的現成、方便的檢測。
對于含多個抗原決定簇的大分子蛋白,使用雙抗體夾心“人ELISA試劑盒"模式測定相當簡便,現有的商品試劑盒基本上都采用此種測定模式。
具體測定方法如下:
1.首先以雙抗體之一于碳酸鹽緩沖液中4℃下包被聚苯乙烯等固相,形成固相抗體,洗滌去除未與固相結合或結合不緊的抗體后,用小牛血清或牛血清白蛋白等封閉,洗滌去除未結合的部分及雜質。
2.加入含待測物的臨床樣本如血清等,溫育一定時間后洗板;此時,待測抗原就會與固相上特異抗體反應而吸附于固相上。
3.加入酶標記的雙抗體之二,溫育一定時間后洗板;此時,在固相上即形成雙抗體與特異抗原的夾心產物。
4.加入酶底物,溫育顯色測定。
抗體的酶標記方法及標記效果測定:良好的酶結合物取決于兩個條件:即高效價的抗體和高活性的酶?贵w的活性和純度對制備標記抗體至關重要,因為特異性免疫反應隨抗體活性和純度的增加而增強。在酶標記過程中,抗體的活性有所降低,故需要純度高、效價高及抗原親和力強的抗體球蛋白,最好使用親和層析提純的抗體,可提高敏感性,而且可稀釋使用,減少非特異性吸附。酶與抗體交聯,常用戊二醛法和過碘酸鹽氧化法。郭春祥建立的HRP標記抗體的改良過碘酸鈉法簡單易行,標記效果好,特別適用于實驗室的小批量制備。其標記程序為:將5μg HRP溶于0.5ml蒸餾水中,加入新鮮配制的0.06 mol/L的過碘酸鈉(NaIO4)水溶液0.5ml,混勻置4℃冰箱30分鐘 , 取出加入0.16mol/L的乙二醇水溶液0.5ml,室溫放置30分鐘后加入含5(g純化抗體的水溶液1ml,混勻并裝透析袋,以0.05mol/L、pH9.5的碳酸鹽緩沖液于4℃冰箱中慢慢攪拌透析6小時(或過夜)使之結合,然后吸出,加硼氫化鈉(NaBH4)溶液( 5(g/ml)0.2ml,置4℃冰箱2小時,將上述結合物混合液加入等體積飽和硫酸銨溶液,置4℃冰箱30分鐘后離心,將所得沉淀物溶于少許0.02mol/L、pH7.4PBS中,并對之透析過夜(4℃),次日離心除去不溶物,即得到酶標抗體,用0.02mol/L、pH7.4PBS稀至5ml,進行測定后,冷凍干燥或低溫保存。
牛ELISA試劑盒實驗過程中需要用到的實驗室器材:
1、標準規格酶標儀;
2、 高速離心機;
3、電熱恒溫培養箱;
4、干凈的試管和Eppendof管;
5、系列可調節移液器及吸頭,一次檢測樣品較多時,最好用多通道移液器;
6、蒸餾水,容量瓶等。
牛ELISA試劑盒組成:
(1)已包被抗原或抗體的固相載體(免疫吸附劑);
(2)酶標記的抗原或抗體(結合物);
(3)酶的底物;
(4)陰性對照品和陽性對照品(定性測定中),參考標準品和控制血清(定量測定中);
(5)結合物及標本的稀釋液;
(6)洗滌液;
(7)酶反應終止液。
牛山梨醇脫氫酶(SDH)ELISA試劑盒操作方法
牛ELISA試劑盒怎樣購買?
1、您確認好了產品后可直接和我們在線聯系,或者是電話聯系,確認您購買的產品。
2、可以把您需要購買的產品確認好以郵件的形式發給我們,這樣您會在24小時內收到我們給您回復確認的郵件,或者是電話。
郵寄(免運費)產品:現貨一般當天定購,隔天由倉庫統一出貨;期貨會在出貨前由專人通知,倉庫備貨,依其產品性能,路途等選擇進行包裝郵寄,客戶如有特別要求,可與銷售人員提前溝通。
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運輸條件:低溫運輸,用干冰或者冰袋低溫運輸。
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牛ELISA試劑盒簡介:
有效期:6個月
預期應用:ELISA法定量測定血清、血漿、細胞培養上清或其它相關生物液體中的含量。
保存溫度:2-8℃低溫保存
用途:科研實驗等領域科學研究,不得用于臨床診斷
應用領域:科研項目實驗
操作流程:稀釋——加樣——溫育——配液——洗滌——加酶——溫育——洗滌——顯色——終止——測定
常見問題:
參數規格:48T/96T
產品資料:有PDF形式、WORD形式說明書
產品優勢:靈敏度高、重復性強
儲存方式:2-8攝氏度(保存到冰箱里就行)
牛ELISA試劑盒操作步驟:
1. 使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產生加樣上的誤差。
2. 根據待測樣品數量加上標準品的數量決定所需的板條數。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據自己的數量來定,能使用復孔的盡量做復孔。標本用標本稀釋液1:1稀釋后加入50ul于反應孔內。
3. 加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時。
4. 甩去孔內液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數增加一次。
5. 每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。
6. 甩去孔內液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數增加一次。
7. 每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。
8. 取出酶標板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應立即測定結果。
9. 在450nm波長處測定各孔的OD值。
上海酶遠生物科技有限公司專業提供elisa試劑盒,種屬齊全,指標成千上萬種,質量好發貨及時,穩定的重復性和可靠高,特異性強,優秀的技術團隊竭誠為您服務。
牛山梨醇脫氫酶(SDH)ELISA試劑盒報價
牛ELISA試劑盒產品特點:
① 準確度高,靈敏度高,特異性強;
② 檢測時間短;
③ 操作簡便;
④ 安全可靠,歡迎咨詢。
牛ELISA試劑盒樣品收集、處理:
1、 血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2、 血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
3、 細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
牛ELISA試劑盒的樣本要求:
1.樣本不能含疊氮鈉(NaN3),因為疊氮鈉(NaN3)是辣根過氧化物酶(HRP)的抑制劑。
2.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能立即試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融。
3.樣本應充分離心,不得有溶血及顆粒。
牛ELISA試劑盒的必知項:
1. 水溶性、低黏度、無腐蝕、不易燃、不污染環境。
2. 所采用的方法特異性好,靈敏度、準確度、精密度。
3. 所用標準品或標準參考物符合推薦標準和要求。
4. 貯存期至少為1年。
“牛ELISA試劑盒”利用抗原抗體之間專一性結合的特性,對樣本進行檢測的實驗方法,通過底物顯色深淺代表待測物在樣本中含量的多少。酶遠問您:可知道它的主要有哪些大用處?
1. 其抗原抗體反應具有高度的特異性。
2. 將酶催化反應的放大作用和抗原抗體親和反應的高度專一性、特異性相結合,以酶標記的抗原或抗體作為主要試劑進行免疫測試,所以具有很高的靈敏度。
3. 實現了在細胞或亞細胞水平上示蹤抗原或抗體的所在部位,或在微克、甚至納克水平上對其進行定量。
“ELISA試劑盒"的實驗中需要注意:
1. 滴加試劑前應將滴瓶翻轉數次,使液體混勻。滴加時瓶身應保持垂直,以使滴量準確。
2. 從冷藏環境中取出時應在室溫環境中平衡30min后方可使用,未用完的微孔條用自封袋密封保存。
3. 所有樣品和廢棄物都應按傳染源處理。終止液為2mol/L硫酸,使用時應注意安全。
4. 若標本OD值在標準曲線測定范圍以外,應適當稀釋后重測。
5. 每批樣本應同時做標準曲線。
6. 酶標板洗滌時各孔均需加滿洗滌液,防止孔內有游離酶不能洗凈。應設定30~60s的洗滌浸泡時間。
目前ELISA(酶聯免疫吸附試驗,酶聯免疫試劑盒)方法已被廣泛應用于多種細菌和病毒等疾病的診斷。在動物檢疫方面,ELISA(酶聯免疫吸附試驗,酶聯免疫試劑盒)在豬傳染性胃腸炎、牛副結核病、牛傳染性鼻氣管炎、豬偽狂犬病、藍舌病等的診斷中已為廣泛采用的標準方法。
上海酶遠生物酶標試劑盒操作中出現的問題:現象、可能原因和解決辦法:
1、 不同廠家生產的試劑盒因生產工藝和操作方法略有不同,務必按照所用試劑盒嚴格操作,否則容易產生檢測結果的不確定性.
2、 若不同批號試劑的不同組分(A液或酶工作液),或不同試劑的不同組分進行交叉使用,有可能出現顯色淺或本底高,花板等情形。
3、 加樣時樣品量誤差,對于陰或很陽的標本影響不大,但對閾值附近的標本影響極大,建議校對加樣器。
4、 反應時間的誤差,做大量標本時,第一孔和最后一孔以及一些特殊標本可能影響較大。
5、 由于滴瓶的精密性肯定不如加樣器,不排除不同滴頭滴量的誤差。另外滴加過程中是否產生氣泡、速度是否均勻,是否顫動等影響液量的因素均可導致以上情況。高標準要求時應使用加樣器。
6、 閾值附近實際上是個灰區(gray scale),不能截然分為陰性、陽性,國外廠家均要求對這部分可疑標本進行奇數次復檢,以次數多者為準,如一次陽兩次陰最后判為陰,但實際上是否為陰不好說,只有判為可疑,臨床上可以讓患者過一段時間后再測。
7、 肉眼觀察稍顯色,酶標儀打印為陰性的標本在實際工作中是難以避免的,肉眼目測結果不可靠,應以酶標儀判讀為準。
8、 由陰性變為強陽性原因多為操作過程中漏加試劑等有關。
酶聯免疫吸附測定enzyme linked immunosorbent assay(簡寫ELISA)指將可溶性的抗原或抗體結合到聚苯乙烯等固相載體上,利用抗原抗體結合專一性進行免疫反應的定性和定量檢測方法。酶聯免疫吸附測定(ELISA)為免疫學中的經典實驗,本詞條從定義、基本原理、分類方法、操作要點等方面對其進行了詳細介紹。上海酶遠“牛ELISA試劑盒"的五大優點:
一、高效、靈敏、特異的抗體;
二、穩定的重復性和可靠性;
三、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相載體;
四、適用血清、血漿、組織勻漿液、細胞培養上清液、尿液等等多種標本類型;
五、最大限度的節省實驗經費。
我公司實驗室現已擁有多個檢測系統:
1.ELISA雙抗夾心法檢測系統
2.ELISA間接法檢測系統
3.ELISA競爭法檢測系統
4.ELISA捕獲包被法檢測系統
5.ABS-ELISA檢測系統
牛山梨醇脫氫酶(SDH)ELISA試劑盒報價
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人ELISA試劑盒參數規格:
產品規格:48T/96T
產地:國產/進口
適用范圍:僅供科研使用
保存條件:2-8℃
保質期:6個月
產品品牌:酶遠生物
檢測波長:450nm
所需樣本體積:50-100ul
產品用途:用于測定血清、血漿及相關液體樣本
樣本類型:適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞上清、組織勻漿等樣本
酶遠生物供應的其他種屬有:人、大鼠、小鼠、豚鼠、倉鼠、兔子、豬、犬、牛、樣、雞、鴨、植物、貓、馬、魚、猴、農殘ELISA試劑盒等
人ELISA試劑盒操作流程:
1. 使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產生加樣上的誤差。
2. 根據待測樣品數量加上標準品的數量決定所需的板條數。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據自己的數量來定,能使用復孔的盡量做復孔。標本用標本稀釋液1:1稀釋后加入50ul于反應孔內。
3. 加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時。
4. 甩去孔內液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數增加一次。
5. 每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。
6. 甩去孔內液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數增加一次。
7. 每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。
8. 取出酶標板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應立即測定結果。
9. 在450nm波長處測定各孔的OD值。
上海酶遠生物科技有限公司專業提供ELISA試劑盒,種屬齊全,指標成千上萬種,質量好發貨及時,穩定的重復性和可靠高,特異性強,優秀的技術團隊竭誠為您服務。
人ELISA試劑盒代測服務:
ELISA試劑盒”含稅含運費,提供代測,中英文雙版說明書,品牌美國RD、RB、IBL、Omega,保證質量,詳情請來電向我司索取信息。
人ELISA試劑盒代正確的選擇方法:
1. 明確檢測何種蛋白;
2. 明確編碼該蛋白的基因與其它哪些物種同源性最好;
3. 尋找檢測這些物種蛋白的試劑盒;
4. 咨詢上海酶遠使用的抗體類型;
5. 做出自己的判斷該買哪個試劑盒。
人ELISA試劑盒產品優勢:
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2、發貨及時;
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人ELISA試劑盒標本要求:
1.血清:全血標本請于室溫放置2小時或4℃后于1000 x g離心20分鐘,取上清即可檢測,或將標本放于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。
2.血漿:可用EDTA或肝素作為抗凝劑,標本采集后30分鐘內于2 - 8° C 1000 x g離心15分鐘,或將標本放于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。
3.細胞培養物上清或其它生物標本:1000 xg離心20分鐘,取上清即可檢測,或將標本放于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。
注:標本溶血會影響最后檢測結果,因此溶血標本不宜進行此項檢測。
ELISA(酶聯免疫吸附試驗,酶聯免疫試劑盒) (以下簡稱ELISA(酶聯免疫吸附試驗,酶聯免疫試劑盒)) :是酶免疫測定技術中應用最廣的技術。其基本方法是將已知的抗原或抗體吸附在固相載體 ( 聚苯乙烯微量反應板 ) 表面,使酶標記的抗原抗體反應在固相表面進行,用洗滌法將液相中的游離成分洗除。常用的 ELISA(酶聯免疫吸附試驗)法有雙抗體夾心法和間接法,前者用于檢測大分子抗原,后者用于測定特異抗體。
人ELISA試劑盒工作原理:
用純化的抗體包被微孔板,制成固相載體,往包被抗該指標抗體的微孔中依次加入標本或標準品、生物素化的抗該指標抗體、HRP標記的親和素,經過徹底洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的該指標呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),計算樣品濃度。
人ELISA試劑盒組成及試劑配制:
1.酶聯板(Assay plate ):一塊(96孔)。
2.標準品(Standard):2瓶(凍干品)。
3.樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4.生物素標記抗體稀釋液(Biotin-antibodyDiluent):1×10ml/瓶。
5.辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6.生物素標記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7.辣根過氧化物酶標記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8.底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9.濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10.終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
人山梨醇脫氫酶(SDH)ELISA檢測分析試劑盒目前價格多少? 人β位淀粉樣前體蛋白裂解酶1(BACE1)ELISA檢測分析試劑盒使用說明書
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4.可通過郵件咨詢及訂購。 1971年Engvall和Perlmann發表了酶聯免疫吸附劑測定(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)用于IgG定量測定的文章,使得1966年開始用于抗原定位的酶標抗體技術發展成液體標本中微量物質的測定方法。這一方法的基本原理是:①使抗原或抗體結合到某種固相載體表面,并保持其免疫活性。②使抗原或抗體與某種酶連接成酶標抗原或抗體,這種酶標抗原或抗體既保留其免疫活性,又保留酶的活性。在測定時,把受檢標本(測定其中的抗體或抗原)和酶標抗原或抗體按不同的步驟與固相載體表面的抗原或抗體起反應。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復合物與其他物質分開,最后結合在固相載體上的酶量與標本中受檢物質的量成一定的比例。加入酶反應的底物后,底物被酶催化變為有色產物,產物的量與標本中受檢物質的量直接相關,故可根據顏色反應的深淺刊物定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,故可極大地放大反應效果,從而使測定方法達到很高的敏感度。人山梨醇脫氫酶(SDH)ELISA檢測分析試劑盒目前價格多少? 人非神經元性烯醇化酶(NNE)ELISA檢測分析試劑盒 生產廠家哪里有?
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人ELISA試劑盒訂購說明:
1、絕大部分產品備有現貨,一般情況下都能訂貨當日發貨。
2、部分非常用產品,需提前1-2日預訂,海外期貨則需要提前3-6周預訂。
3、部分產品價格會因貨期、批次等因素發生變化,若有變動以訂貨當日最新價格為準。
4、每日訂單截止時間為16點整,部分城市可到17點整,因超過截止時間造成當日不能發貨的將于次日安排發貨。
5、請辦理完貨款后,將收據、底單等連同收貨人的地址、姓名、電話等以傳真、EMail、電話等形式通知我們。
This kit is for in vitro research use, not for clinical diagnosis!
簡介: 產品名稱:人山梨醇脫氫酶(SDH)elisa試劑盒96T/48T 英文名稱:Human SDH (Sorbitol Dehydrogenase) ELISA Kit 種屬:Human/人 品牌:EK-Bioscience 貨號:EK-H11474 規格:96T/48T 價格:請QQ或電話與客服聯系獲取報價 貨期:現貨 保質期:6個月 參數規格 中文名稱 | English name | 96T/48T 含量 | 保存 |
ELISA酶標板(可拆卸) | Microelisa stripplate | 8×12 / 8×6 * | 2-8℃ |
標準品 | Standard | 1瓶 0.5ml * | 2-8℃ |
標準品稀釋液 | Standard diluent | 1 瓶 1.5ml * | 2-8℃ |
酶標試劑 | HRP-Conjugate reagent | 1 瓶 6 ml/3ml * | 2-8℃ |
樣品稀釋液 | Sample diluent | 1 瓶 6 ml/3ml * | 2-8℃ |
顯色劑 A 液 | Chromogen Solution A | 1 瓶 6 ml/3ml * | 2-8℃ |
顯色劑 B 液 | Chromogen Solution B | 1 瓶 6 ml/3ml * | 2-8℃ |
終止液 | Stop Solution | 1 瓶 6 ml/3ml * | 2-8℃ |
濃縮洗滌液 | wash solution | 1 瓶20ml * | 2-8℃ |
說明書 | Instruction | 1份 * |
|
封板膜 | Closure plate membrane | 2 片 * |
|
密封袋 | Sealed bags | 1個 * |
|
1. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
2. 血漿:應根據標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成應再次離心。
3. 尿液:用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
4. 細胞培養上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。
5. 培養細胞:檢測細胞內的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
6. 組織標本:切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
7. 標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融
8.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
試驗所需自備物品:
1. 酶標儀(450nm波長濾光片)
2. 高精度移液器,EP管及一次性吸頭
3. 37℃恒溫箱,雙蒸水或去離子水
4. 吸水紙5.人山梨醇脫氫酶(SDH)ELISA試劑盒96T/48T操作流程
計算人山梨醇脫氫酶(SDH)ELISA試劑盒96T/48T濃度
以標準物的濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋倍數;或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數,即為樣品的實際濃度。
This kit is for in vitro research use, not for clinical diagnosis!
Ek-Bioscience EK-H11067 人金屬硫蛋白1(MT1)ELISA試劑盒
Ek-Bioscience EK-H10251 人α1-微球蛋白(α1-MG)ELISA試劑盒
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