2皮帶:采用2MM厚W為400MM綠色防靜電膠皮
3導軌:采用40*70專用鋁型材制作
4主機架及燈架:采用40*40*1.5mm方通噴涂制作
5托輥及托盤:皮帶上方采用鍍鋅板折彎托盤及直徑25滾筒承托,下方采用直徑25滾筒承托
6、中間儀表臺及兩側長條工作臺:采用16mm厚,儀表臺寬度為400mm,長條工作臺寬度為300mm,上鋪2mm綠色防靜電膠皮,四周封藍或灰邊條
7、插座為三位萬能插座,每一米雙邊配置,位于儀表臺兩側
8、照明:采用60*60鋁型材線槽,T8-28單支帶罩熒光燈,連續安裝,雙邊配置
9、作業指導書:置于線體側上方,每工位設A4亞克力板兩塊,一綠色一透明
10、氣管采用3/4鍍鋅管,每米一套1/2雙出風口氣嘴,兩側每米各配一個風批滑輪.
11、規格:L8000*W1200*1850MM(含燈架高度)
該儀器是測定煤中全水分的智能化儀器,它嚴格按國標(GB/T211-1996)的有關要求自動完成全水分的測定過程。它還可用于測定其它非金屬的水分含量。
產品特點:
采用最新型控制電路,大屏幕LCD液晶顯示器,原裝進口電子天平,稱量穩定,快速、可靠、集成度高。儀器高度智能化、自動化、性能更加穩定可靠。儀器自動判定有無樣品。設置快速、恒重兩種測定程序、微波、紅外、組合三種烘干方法,測定數據自動打印。
技術指標:
1. 工作電源:AC220±20V 50Hz;
2. 微波輸入功率:≤1400W;
3. 微波輸出功率:≤900W;
4. 微波頻率:2450MHz;
5. 紅外功率:≤1200W;
6. 天平稱量范圍:≤310g;
7. 天平分辨率:0.001g(2000F型為0.0001g);
8. 水分測定精度:優于0.4%;
9. 儀器外形尺寸:510mm×380mm×540mm;
10. 工作溫度:0—40℃
11. 相對濕度:≤85%
12. 試樣要求:粒度<6mm;
13. 質 量:8~14g(2003F型為1g+0.2g)。
廠家奧德賽創拉壓傳感器
特點和用途: 不銹鋼或鋁合金結構,體積小。適用于各種小空間測力,廣泛用于工業,科研,測控等領域的測量和控制。
量程 | 螺絲尺寸 |
10KG | M3 |
50KG | M5 |
100KG | M6 |
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Multitron Pro/Cell技術參數:
型號 | Multitron Pro | |||
振蕩速度(rpm) | 范圍:20~400rpm(三層疊加時,頂層最高轉速可達250rpm) 轉速控制精度:0.1rpm | |||
振幅(mm) | 25mm和50mm可選,或選擇可調直徑振蕩單元 | |||
溫度(℃) | 溫度控制范圍:常溫型:RT+6℃~65℃最高溫度可到80℃;溫度顯示分辨率: 數字顯示0.1℃ 溫度穩定性: ±0.1℃; 溫場均勻性: ±0.2℃ 加熱功率:1000W | 低溫型:側裝制冷:室溫以下20℃~65℃,頂部制冷:室溫以下12℃~65℃,最低4℃ 制冷功率:300W 箱體內空氣循環效率:360m3/h 溫度控制模式: PID控制模式 | ||
定時功能及程序控制 | 可以實現長時間的連續不同功能狀態的程序控制, 最多可達9天 | |||
承載量 | 托板尺寸(w x d): M-tray 470 x 850 mm 承載錐形瓶數量: 31 x 500 ml flask | 最大承載量: 35kg 19 x 1000 ml flask | ||
注:以上為使用錐形瓶彈簧夾的承載量,如果選用INFORS專利的粘性片,承載量將增加10%左右 | ||||
箱體體積(L) | 250L | |||
光照 | Fl管,30瓦 | |||
CO2監測和控制 | 測量原理:紅外探測原理 控制范圍:0-20% 顯示分辨率:0.1% 精度:±1%FS | 溫度變化引起的波動性: 0.02% /℃ 長期使用的波動度: < 1% /2年 控制器模式:PID,數字化 二氧化碳供應:最大 0.5 bar過壓 | ||
濕度控制 | 范圍:0~95% r.h 分辨率:digital 1% r.h. 精度:±1% r.h. | |||
UV滅菌 | 可選 | |||
可移動的PT-100溫度傳感器 | 控溫精度:±0.1℃ | |||
環境溫度 | +5℃到40℃ | |||
電源 | 220~240V/50~60Hz | |||
重量(不含托板) | 90kg(單層,常溫型) / 120kg(單層,低溫型) | |||
特色托板和保濕盒
訂貨號 | 描述 |
31302 | 微孔板/深孔板混用托板(可放置酶標板72塊,或深孔板48塊,在固定棒上裝有環形酶標板分隔件,保證所有的酶標板均有相同的培養環境) |
62396 | 有的酶標板均有相同的培養環境)深孔板專用托板(可放置深孔板 3×24 塊),在固定棒上裝有快開型微孔板分隔件,保證所有的微孔板均有相同的培養環境 |
31493 | 微孔板專用托板(可放置酶標板96塊,在固定棒上裝有快開型酶標板分隔件,保證所有的酶標板均有相同的培養環境) |
66399 | 酶標板專用培養盒,帶頂部帶通氣過濾孔,可以有效減低蒸發,減少染菌的概率,建議同時選配培養箱加濕單元 |
INFORS系列搖床還包括:
型號 | 名稱 | 描述 |
Orbitron | 振蕩搖床 | 穩定可靠的專利五驅技術,振蕩承載自動平衡功能,穩定超靜音,極低摩擦振蕩運行,絕對避免上下震動,非常適合實驗室高負載,高強度的振蕩培養要求。承載量:31kg(取決于托板的規格) |
Celltron | 磁驅振蕩搖床 | 全球唯一可以放入CO2培養箱中的振蕩搖床 控溫范圍:4℃~60℃(控制器最高使用溫度45℃) 轉速:20~200rpm,控制精度1%Max |
Ecotron | 標準型振蕩培養箱 | 可以放在實驗臺下的標準搖床,節省實驗室空間,體積 85 L 控溫范圍:常溫型: 室溫+5~60℃;低溫型:+4~60℃ 轉速:30-550rpm |
Minitron | 多功能磁驅振蕩培養箱 | 可以兩層疊加的搖床,單層體積160 L 控溫范圍:常溫型:室溫+5℃~65℃;低溫型:+4℃~65℃ 轉速:20~400rpm 擴展功能:制冷功能、0~20%CO2濃度控制 (紅外監測控制)、濕度控制、進氣控制及厭氧培養、遮光培養、加裝靜態培養隔層、光照強度控制套件(日夜光照和光合光照兩類,客戶可以編程控制,模擬自然生長條件)以及UV滅菌功能 |
Microtron | 高通量篩選振蕩培養箱 | Multitron pro的特殊型號,非常適合大量酶標板、培養板的篩選 轉速::50~999rpm 最大承載量:可以同時振蕩96個標準微孔板或者72個深孔板 |
Thermotron | 高溫振蕩培養箱 | Multitron的特殊型號,非常適合對嗜熱生物的高溫培養, 也可以用于在高溫霧氣加熱下清除培養箱中的污染物。 溫度范圍:室溫+5℃~95℃(低溫型,室溫下15℃) |
Multitron standard | 標準振蕩培養箱 | 標準型微生物振蕩培養箱,可以三層疊加 |
電廠涼水塔防腐,電廠冷卻塔防腐施工
公司是從事煙囪、水塔等高空建筑防腐維修安裝的資質齊全的專業性企業。運用《無腳手架、不停產施工、高空懸掛作業》等技術,主要承攬240米以內的各類構建筑的新建、拆除、防腐、加固、安裝:承攬新建煙囪、煙囪拆除加高、煙囪油漆涂刷航標色環、囪身外粉刷、煙囪質量安全檢測、大廈外墻清洗、新建水塔、帶壓堵漏等高空工程。替大廈“梳妝”,為煙囪“整容”。經過二十多年的艱苦創業,現已發展成為領導班子齊全、技術力量雄厚、施工隊伍龐大、企業資源豐厚的現代高空專業隊伍,員工一律持特種行業技術操作證上崗。公司修訂了《高空作業施工條律》和《高空懸掛作業技術安全細則》等各項規章制度。為公司多年來的“安全施工”提供了強有力的保障。我司具備履行中大型工程合同的能力,是為您排難解憂、消除隱患、創企業的堅強后盾。公司下轄四個分公司(高空維修工程公司、高空防腐工程公司、安裝工程公司、清洗堵漏工程公司)和十八個工程隊,為全國數百家企業解決了若干“高、大、難”的特殊工程項目,填補了我國建筑的空白。 專業高空煙囪新建、煙囪拆除、煙囪維修、煙囪防腐、煙囪裝飾、煙囪美化、煙囪加固加箍、煙囪增高,煙囪傾斜矯正、煙囪更換內襯,煙囪外粉刷、煙囪安裝平臺、鋼結構防腐,電視塔防腐,電廠涼水塔內外壁防腐、電廠煙囪刷航標色環、安裝避雷針、爬梯、平臺、護網及露天金屬更換加固油漆防腐等。 ★承攬發電廠,熱電廠,鋼鐵廠,化工廠,造紙廠,玻璃廠,制藥廠,焦化廠,印染廠,味精調味品廠,鈦廠,橡膠輪胎廠,化肥廠,水泥廠,陶瓷廠,助劑溶劑廠,食品廠,酒廠,紡織廠,印染廠,冶煉冶金廠,金礦石油化工單位,卷煙廠,鋁業銅廠,廣播電視臺及新型材料廠等各工礦企業單位的:高空建筑工程、高空維修工程、高空安裝工程、高空油漆防腐、高空清洗美化、防水堵漏、防水涂料粉刷及石油化學化工設備防腐保溫和煙囪的煙道煙氣環保脫硫除塵、環保衛生高空檢測等高空作業工程。 ★本司承攬過(國內.國外)高空建筑工程、高空維修工程、高空防腐工程等高空作業工程(高度不限,不搭腳手架,不停產施工)歡迎國內外新老用戶合作咨詢。 專業承接高空工程:高空維修,高空防腐,高空建筑,高空作業,高空清洗,高空施工,高空廣告,高空油漆,高空粉刷,高空美化,高空懸掛,高空行業,高空企業,高空修建,高空新建,專業高空公司。 煙囪公司:煙囪新建,拆除煙囪,煙囪維修,煙囪加高,煙囪拆除,煙囪防腐,煙囪新建煙囪施工,煙囪滑模,煙囪裝飾美化,新建煙囪,磚煙囪新建,砼煙囪新建,水泥煙囪新建,鍋爐煙囪新建,煙囪工程,煙囪建筑,煙囪加固,煙筒網,煙囪王,修煙囪,建煙囪,拆煙囪,煙囪美化,煙囪刷色環.煙囪工程,防腐:管道防腐,水塔防腐工程,防腐公司,防腐施工,金屬防腐,橋梁防腐,涼水塔防腐,冷卻塔防腐,防腐保溫,油罐防腐,化工防腐,造粒塔防腐,煙囪防腐公司。堵漏:防水堵漏,帶壓堵漏,水塔堵漏,專業堵漏,水池堵漏,地下管道堵漏,冷卻塔防腐堵漏工程的專業性公司! 清洗:大廈清洗,大樓清洗,外墻清洗,玻璃幕墻裝飾,清洗大樓,清洗大廈,清洗外墻,高樓清洗,賓館大廈等高空清洗工程! ★公司:凡由我司施工過的單位,在保質期內我司定期回訪或電話聯絡,詢問工程質量情況;若在保質期內有質量問題我司免費檢查。 ★服務宗旨:“質量、講究信譽、確保安全、信守合約、定期回訪” ★施工特點:“不搭腳手 無需停產 高懸作業施工
聯系電話135 6451 5386 QQ 1161399267 余先生
檢測方法: ELISA酶聯免疫法
說 明 書:隨貨發送,也可直接聯系在線銷售索取
測試種屬:人、大小鼠、豚鼠、兔子、牛、羊、豬、雞、鴨elisa試劑盒等種屬
檢測目的:用于測定血清,血漿及相關液體等樣本。例如適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細胞培養上清、組織勻漿等標本。
試劑盒保存及有效期:2-8℃,避光保存:6個月。
產品產地:進口/國產
產品庫存:
品牌:自主研發/進口原裝
產品價格:價格優惠,歡迎來電洽談!
試劑盒使用范圍:僅供科研檢測,不得用于臨床.
產品價格:價格優惠,歡迎來電洽談!
ELISA試劑盒定性定量檢測一步到位,可同時大批量完成多種屬的檢測工作,而且一天之內可以檢查幾百甚至上千份標本,正規專業的我們,一定能幫您,將實驗做得更好,更精確。試驗過程中,如有任何疑問都可和我們聯系,無論是售前、售中、售后我們都將始終如一,將優質服務進行到底。
本試劑盒僅供研究使用。
試劑盒組成
1 | 20倍濃縮洗滌液 | 50ml×1瓶 |
9 | 標準品S1(6 IU/L) | 0.5ml×1瓶 |
2 | 鏈霉親和素-HRP | 6ml×1瓶 | 標準品S2(4 IU/L) | 0.5ml×1瓶 | |
3 | 酶標包被板 | 12孔×8條 | 標準品S3(2 IU/L) | 0.5ml×1瓶 | |
4 | 生物素標記的抗-IgG抗體 | 6ml×1瓶 | 標準品S4(1IU/L) | 0.5ml×1瓶 | |
5 | 顯色劑A液 | 6ml×1瓶 | 標準品S5(0.5 IU/L) | 0.5ml×1瓶 | |
6 | 顯色劑B液 | 6ml×1/瓶 | 10 | 密封袋 | 1個 |
7 | 終止液 | 6ml×1瓶 | 11 | 封板膜 | 3張 |
8 | 樣品稀釋液 | 6ml×1瓶 | 12 | 說明書 | 1份 |
標本要求
1.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
2.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融
操作步驟
1. 根據待測樣品數量加上標準品的數量決定所需的板條數。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據自己的數量來定,能使用復孔的盡量做復孔。
2. 加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品,其余各步操作相同)、標準品孔、待測樣品孔。然后在標準品孔中加入標準品50μl,在樣本反應孔中先加入待測樣品10μl再加入樣品稀釋液40μl(樣品最終稀釋度為5倍),蓋上封板膜,輕輕振蕩混勻,37℃溫育45分鐘。
3. 配液:將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用
4. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復4次,拍干。
5. 加生物素標記的抗-IgG抗體:每孔加入生物素標記的抗-IgG抗體50μl。37℃溫育30分鐘
6. 洗滌:操作同4。
7. 加鏈霉親和素-HRP:每孔加入50μl的鏈酶親和素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。
8. 洗滌:操作同4。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A 50μl,再加入顯色劑B 50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
11. 測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行。
計算
以標準物的濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋倍數;或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值待入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數,即為樣品的實際濃度。
注意事項
1.試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。
2.濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。
3.各步加樣均應使用加樣器,并經常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間最好控制在5分鐘內,如標本數量多,推薦使用排槍加樣。
4. 如標本中待測物質含量過高(樣本OD值大于標準品孔第一孔的OD值),請先將樣本稀釋一定倍數(n倍)后再測定,計算時請最后乘以稀釋倍數(×5×n)。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.本試劑不同批號組分不得混用。顯色劑B請避光保存。
7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.
8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
9. 如與英文說明書有異,以英文說明書為準。
檢測范圍:0.312 mU/ml-20 mU/ml
靈敏度:0.078 mU/ml
規格:
96人份/盒
保存條件及有效期
1.試劑盒保存:;2-8℃。
2.有效期:6個月
關于ELISA試劑盒
ELISA試劑盒在國內有許多種叫法,例如:ELISA檢測試劑盒、ELISA Kit、酶聯免疫試劑盒、酶聯免疫吸附測定試劑盒、酶聯免疫分析試劑盒、酶免試劑盒等,比較常見的叫法是ELISA檢測試劑盒、酶聯免疫吸附測定試劑盒等。
ELISA試劑盒自從60-70年代問世以來,得到全世界科研工作者的認可及推崇,在歐美及中國獲得很大的推廣,尤其是國內生化領域的長足發展。
Elisa生物試驗是一種敏感性高,特異性強,重復性好的實驗診斷方法。由于其試劑穩定、易保存,操作簡便,結果判斷較客觀等因素,已廣泛應用在免疫學檢驗的各領域中。ELISA檢測試劑盒適用于體外定性檢測人血清或血漿中的抗人類戊型肝炎(HEV)病毒 IgM 抗體ELISA檢測。
免疫測定技術的基礎在于抗原抗體之間的特異結合反應,所以任何優質的診斷試劑離不開優質的原料,如抗原抗體,酶等。以前用于免疫測定的抗原通常為各種純化抗原,而抗體則為純化抗原免疫動物后獲得的多克隆抗體和使用雜交瘤技術得到的單克隆抗體,而抗原或抗體的標記物如酶標結合物則通過各種化學合成方法制備。近年來,隨著分子生物學的發展,使用基因工程方法制備各種特殊的抗原或抗體及其酶結合物等免疫測定試劑幾成為現實的新一代試劑,各種新型使用的測定方法也不斷出現。
HBsAg試劑特點(檢測模式:臨床抗體夾心法):包被抗體為山羊多抗。多抗具有高親和性和對抗原各種表位的反應性。酶表抗體為與HBsAg有不同結合位點的鼠復合單位,可測得HBsAg變異樣品,提高檢測的特異性(99.98%)提高檢測的靈敏度,應用Parl Ehrich 學說(PEI)HBsAg標準品,對ad標準品的靈敏度為0.05ng/ml對ay標準品靈敏度為0.025ng/ml
ELISA檢測試劑盒應用定性夾心免疫檢測技術,用合成的HEV多肽抗原包被微孔板板條,這些多肽是中國型HEV毒株核心氨基酸序列中抗原性很強的肽段,分別來自于該毒株的開放閱讀框2和開放閱讀框3。將樣品或標準品加入孔中并孵育,如果其中存在HEV IgM抗體,這些抗體就會與HEV 的多肽抗原結合,并固定在上面,洗板除去其它非特異性抗體和樣品中的其它成份。然后加入羊抗人IgM-HRP(辣根過氧化物酶)酶結合物,經第二次孵育后,酶結合物就會與第一次孵育結合上的HEV IgM抗體相結合,洗板除去未結合的酶結合物,加入TMB底物溶液,在第三次孵育時會發生酶-底物反應,只有那些含有HEV IgM抗體和酶結合物所形成的復合物的孔才會發生顏色變化,加入硫酸溶液終止酶和底物間的反應,并在波長: 450nm處測量O.D.值,按照本HEV IgM抗體elisa試劑盒的測試標準, O.D.值大于或等于Cut-Off值的樣品被認為是初試陽性。
LISA的基礎是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。結合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學活性,酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學活性,又保留酶的活性。在測定時,受檢標本(測定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起反應。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復合物與液體中的其他物質分開。再加入酶標記的抗原或抗體,也通過反應而結合在固相載體上。此時固相上的酶量與標本中受檢物質的量呈一定的比例。加入酶反應的底物后,底物被酶催化成為有色產物,產物的量與標本中受檢物質的量直接相關,故可根據呈色的深淺進行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,間接地放大了免疫反應的結果,使測定方法達到很高的敏感度。 ELISA可用于測定抗原,也可用于測定抗體。
然而,影響Elisa試驗結果的因素很多,故加強各個環節的質量保證才能充分發揮其方法學的優點。
特點:一、高效、靈敏、特異的抗體; 二、穩定的重復性和可靠性; 三、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相載體; 四、適用血清、血漿、組織勻漿液、細胞培養上清液、尿液等等多種標本類型; 五、節省實驗經費。
elisa試劑盒回收率是反應待測物在樣品分析過程中的損失的程度,損失越少,回收率越高,如果作標液1PPM,就是1毫克/升,而作出標準數據為0.99毫克/升,就是說你的回收率是99%,這個與真實成分有密切的關系,說明方法的準確度。比如水中總無機氯含量測定,樣品水中含有無機氯20mg/L,取100mL被測水樣品,加入0.1mL濃度為10mg/mL的含無機氯標準樣品,測定時忽略體積變化,如果測定出樣品中無機氯為2.98mg/L,則認為回收率為99%。
安全性
1. 避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。
2. 實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。
3. 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。
4. 試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
5. 實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。
6. 不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。
7. 使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。
8. 使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
9. 洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
10. 底物A應揮發,避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
11. 加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
12. 按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
elisa試劑盒測試要求
做好對照
正式試驗時,應分別以陽性對照與陰性對照控制試驗條件,待檢樣品應作一式二份,以保證實驗結果的準確性。有時本底較高,說明有非特異性反應,可采用羊血清、兔血清或BSA等封閉。
實驗條件的選擇
在ELISA中,進行各項實驗條件的選擇是很重要的,其中包括:
(1) 固相載體的選擇:許多物質可作為固相載體,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體,在使用前均可進行篩選:用等量抗原包被,在同一實驗條件下進行反應,觀察其顯色反應是否均一性,據此判明其吸附性能是否良好。
(2) 包被抗體(或抗原)的選擇:將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時,要求純度要好,吸附時一般要求PH在9.0~9.6之間。吸附溫度,時間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃ 18~24小時。蛋白質包被的最適濃度需進行滴定:即用不同的蛋白質濃度(0.1、1.0和10μg/ml等)進行包被后,在其它試驗條件相同時,觀察陽性標本的OD值。選擇OD值最大而蛋白量最少的濃度。對于多數蛋白質來說通常為1~10μg/ml。
(3) 酶標記抗體工作濃度的選擇:首先用直接ELISA法進行初步效價的滴定(見酶標記抗體部份)。然后再固定其它條件或采取“方陣法”(包被物、待檢樣品的參考品及酶標記抗體分別為不同的稀釋度)在正式實驗系統里準確地滴定其工作濃度。
(4) 酶的底物及供氫體的選擇:對供氫體的選擇要求是價廉、安全、有明顯地顯色反應,而本身無色。有些供氫體(如OPD等)有潛在的致癌作用,應注意防護。有條件者應使用不致癌、靈敏度高的供氫體,如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體。底物作用一段時間后,應加入強酸或強堿以終止反應。通常底物作用時間,以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制,尤其是H2O2在臨用前加入。
檢測范圍和靈敏度不同,用量少時,可使用分裝,前期是它的長久性不是很好。
試劑盒的標準曲線最高點OD 值均在2.0±0.2,零孔的OD 值都控制在0.10以下。
試劑盒的標準曲線相關系數R≥0.98。
試劑盒重復性好,板內、板間變異系數均<9 %。
試劑的組份都多給20%的富余量,確保完成48/96孔的檢測,避免分次檢測可能造成試劑量不足的情況。
檢測抗體及酶結合物的稀釋度合適(均為1:30), 方便試驗操作者準確地做稀釋工作,保證實驗結果的重復性
ELISA法是免疫診斷中的一項新技術,現已成功地應用于多種病原微生物所引起的傳染病、寄生蟲病及非傳染病等方面的免疫診斷。也已應用于大分子抗原和小分子抗原的定量測定,根據已經使用的結果,認為ELISA法具有靈敏、特異、簡單、快速、穩定及易于自動化操作等特點。不僅適用于臨床標本的檢查,而且由于一天之內可以檢查幾百甚至上千份標本,因此,也適合于血清流行病學調查。本法不僅可以用來測定抗體,而且也可用于測定體液中的循環抗原,所以也是一種早期診斷的良好方法。因此ELISA法在生物醫學各領域的應用范圍日益擴大
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